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间接免疫荧光法和酶联免疫吸附试验对抗中性粒细胞胞质抗体检测方法的结果比较

2021-06-13于潇

中国医药指南 2021年11期
关键词:生物检测

于 潇

(沈阳金域医学检验所有限公司实验室诊断部,辽宁 沈阳 110164)

抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)是抗中性粒细胞颗粒和单核细胞溶酶体的IgG抗体。肾肺综合征的发病率与ANCA密切相关且已有许多关于靶抗原的报道[1-3]。抗原蛋白酶3(PR3)检测和抗原髓过氧化物酶(MPO)检测可有效的诊断非传染性非典型肺炎[4-6]。目前临床ANCA实验室检测技术主要有临床间接免疫荧光法(IIF)、临床酶联免疫吸附法(ELISA)、临床放射免疫法(RIA)、临床免疫印迹法(IB)和临床流式细胞仪(FCM)检测,其中临床IIF和临床ELISA法在临床上应用较为广泛。笔者用IIF和ELISA检测ANCA并对两种临床方法的结果进行了一致性分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年1月至2019年1月在沈阳金域医学检验所有限公司实验室诊断部的抗中性粒细胞胞质抗体检测样本200例进行IIF和ELISA检测,所有阳性结果的血清分管并置零下75 ℃保存。

1.2 方法 仪器及试剂:①IIF试剂由德国奥蒙公司的粒细胞镶嵌检测试剂盒批号为F100134Y。每个试验区包含四种生物切片即乙醇固定颗粒细胞生物切片、甲醛固定颗粒细胞生物切片、Hep2细胞生物切片和灵长类肝组织生物切片。②荧光显微镜由德国奥蒙宫制造的欧洲之星荧光显微镜。③Pr3试剂、MPO试剂由德国奥蒙公司的MPO和Pr1酶联免疫吸附试剂盒,分别为E04234BK和E09235AQ批次;IIF法严格按照制造商的试剂说明操作,阴性和阳性对照血清清稀释比为1∶14并在500倍荧光显微镜下用异硫氰酸荧光素(FITC)和乙醇固定中性粒细胞基质板标记荧光抗体。均匀胞质颗粒特异性荧光对胞质型(CANCA)呈阳性并对核周型抗体(PANCA)呈阳性。……

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