周裕凯，余 茹，张先杰，夏乐强

随着找国人口老龄化，全身麻醉药物对老年患者神经毒性的研究成为麻醉学领域的热点，但因缺乏血液特异性标志物，且受伦理限制无法获得人大脑切片，该类研究多集中在基础领域。

异氟烷（isoflurane，Iso）作为吸入麻醉药，能通过影响淀粉样β(amyloid-β，Aβ)蛋白在细胞外累积和异常表达的磷酸化Tau（phosphorylated tau,p-Tau）蛋白在细胞内形成，加速老年常见神经退行性疾病——阿茨海默病（Alzheimer's disease,AD）的病理过程[1-2]。锂盐、黄芪甲苷和甘草酸苷等均被证实能在动物模型中减轻异氟烷神经毒性，起到保护作用[3-5]。

亚甲蓝（methylene blue，MB）是一种阳离子噻嗪类染色剂，最早在上世纪90年代，被发现能减缓AD病理过程[6]，其衍生合成的新药能治疗轻、中度AD[7]。亚甲蓝还能通过NO-鸟苷酸环化酶信号通路和异氟烷产生交互影响[8]，但其能否减轻异氟烷神经毒性，目前尚缺乏相关报道。

本研究通过老年AD小鼠模型，观察了行为学表现和蛋白表达，旨在探讨亚甲蓝对异氟烷神经毒性的影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物 采用南京生物医药研究院提供的12月龄雄性C57BL/6野生型小鼠(WT鼠)和C57BL/6 AD转基因APP695小鼠（APP鼠），生产许可证为[SCXK（苏）2015-0001]。饲养于重庆威斯腾生物医药科技有限责任公司SPF级动物房，使用许可证为[SYXK（渝）2019-0002]。保持动物房12～12 h昼夜交替，温度23～25℃，自由饮水、进食，适应性喂养1 w后进行实验。本研究通过德阳市人民医院伦理委员会审查，审查号：2020-04-180。

1.2 分组及处理方法 WT鼠和APP鼠共分为4组。WTMB组和APPMB组：经尾静脉注入2 mg/kg亚甲蓝（济川药业集团有限公司，批号为1406012）15 min后，放入有机玻璃盒子(5 cm×5 cm×15cm)吸入100%氧气（1 L/min）；……