苑园园，龚建刚，王子娇，郭凯元，孙 炜，封龙宽，季明月

（1.衡水学院 生命科学学院，河北 衡水 053000；2.河北农业大学食品科技学院，河北 保定 071001；3.天津市红桥区市场监督管理局，天津 300131）

乳酶生也叫食母生，是一种微生态活菌制剂，其在肠道中能分解乳糖生成乙酸和乳酸，进而降低pH值。同时，通过分解乳糖产生的细菌素能够抑制有害微生物的繁殖，起到缓解消化异常、减轻腹泻腹胀等作用[1-2]。乳酶生生产菌种开始时命名为“乳酸肠球菌”，后更改为肠链球菌（Streptococcus faecalis）、粪肠球菌（Enterococcus faecalis）[3]。近年来，许多研究发现[4-6]，由于早期鉴定手段落后或命名不规范等原因，乳酶生生产菌株粪肠球菌有可能为屎肠球菌（E.faecium）。2015年中国药典二部正文品种第一部分已对该问题进行了正式更改[7]。16S rDNA在原核生物中具有高度保守性，可通过比较其序列同源性高低来判断微生物种属关系，是菌种鉴定中常用的分子生物学方法[8]，也是传统形态和生理生化鉴定法的补充和佐证。

屎肠球菌是一种农业部允许作为饲料添加剂使用的乳酸菌，能促进营养物质吸收、抑制其他有害菌生长[9-12]，如果开发成动物微生态制剂会有很大的应用前景。实现工业化生产的关键是提高其生物量即活菌量，但由于屎肠球菌作为乳酸菌的一种，常使用的MRS培养基价格高，难以推广应用。

本试验通过传统培养分离法从乳酶生片中分离乳酸菌，采用生理生化试验及分子生物学技术对分离菌株进行鉴定，并以活菌数为响应指标，采用单因素试验及响应面试验对其增殖培养条件及培养基成分进行优化，以期降低制造成本的同时，为工业生产提供理论依据。……