毛 骞,陈翠翠,梁焕坤,刘鹏娥,钟树海,李来庆

（1.北华大学附属医院内分泌科，吉林 吉林132001；2.广州优迪生物科技股份有限公司，广东 广州510663）

近年来，骨质疏松症发病率不断升高，严重威胁人们的健康和生命安全［1］。骨质疏松症早期常不能引起人们的注意和重视，就诊时病情严重甚至已发生骨折。目前主要采用双能X线吸收仪（dual energy X-ray absorptiometry，DXA）测定骨密度来诊断骨质疏松症，但存在价格昂贵、操作繁琐和普及率低等不足，在基层难以推广应用［2-3］。因此，早期快速、准确、敏感和定量诊断对预防和监测骨质疏松症具有重要意义。β胶联降解产物又称Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列（β-cross-linked C-terminal telopeptide of typeⅠcollagen，β-CTX），是骨重建过程中胶原被降解后释放入血的片段，β-CTX水平的升高反映了骨吸收程度、骨质流失增加，以致骨质疏松症和变形性骨病的发生。β-CTX与骨转换或骨矿物质密度（bone mineral density，BMD）等标志物之间存在相关性，是诊断骨转移的潜在标志物［4-5］。骨钙素可直接反映骨形成的状况，但血液标本放在室温下1 h后，骨钙素即会大量降解，其降解产物骨钙素N端中分子片段 （N-terminal middle molecular fragment of osteocalein，N-MID）因其具有良好的稳定性和重复性，可代替骨钙素反映骨形成状态［6］。因此，N-MID常应用于骨质疏松症的临床疗效观察和预后判断［7-8］。本研究在国内首次建立了β-CTX和N-MID水平双标记的时间分辨免疫荧光分析（double-labeled time-resolved immunofluorescence analysis，TRFIA）法，以ELISA检测结果作为金标准进行对比，为快速、精准筛查或监测骨质疏松症提供了新的技术手段。

1 材料与方法

1.1 抗体、试剂和仪器

抗β-CTX和N-MID单克隆抗体（MAb）4E5和2B7（包被抗体）、2G6和5A 3（检测抗……