冯曜宇,张承磊,侯丽娟,王益夫,吴秀玲,马云海

（1.昆明医科大学第一附属医院血管外科，云南 昆明650031；2.云南大学附属医院普外三科，云南 昆明650021；3.昆明医科大学第一附属医院甲状腺外科，云南 昆明650031）

甲状腺癌是最常见的内分泌恶性肿瘤，虽然仅占全身恶性肿瘤的1%，但近年来发病率迅速增长［1-2］。放射性核素131I是治疗分化型甲状腺癌的有效方法［3-4］。然而，由于甲状腺癌细胞易发生继发性放疗抵抗，导致放疗后病灶残留、增殖和转移，无法达到预期治疗效果。研究［5］显示：微小RNA（microRNA，miRNA）的异常表达与肿瘤的放疗抵抗有密切关联，例如miR-22通过下调沉默调节蛋白1（sirtuin 1，Sirt1）表达水平抑制乳腺癌的放疗抵抗。miR-24通过靶向刺激蛋白1（stimulating protein 1，SP1）并下调其表达水平从而抑制鼻咽癌的放疗抵抗［6］。研究［7-8］表明：miR-222-3p在甲状腺癌细胞中高表达，其可以促进癌细胞的侵袭和转移，但miR-222-3p通过靶向下游基因调控甲状腺癌131I放疗抵抗的具体分子机制尚未见报道。本研究通过敲降甲状腺癌细胞中miR-222-3p表达，探讨敲降miR-222-3p对甲状腺癌131I放疗抵抗的作用机制，为甲状腺癌临床治疗131I放疗抵抗提供依据。

1 材料与方法

1.1 细胞、主要试剂和仪器人甲状腺癌K1细胞（货号：BNCC337627）、人乳头瘤状甲状腺癌TPC-1细胞（货号：BNCC337912）、人乳头状甲状腺癌BCPAP细胞（货号：BNCC338685）和正常甲状腺滤泡上皮Nth-ori 3-1细胞（货号：BNCC340487）均购于北京北纳创联生物技术研究院（ATCC细胞库）。TRIzol Reagent试剂盒和一步法逆转录试剂盒One Step TB GreenTMPrimeScriptTM实时荧光定量PCR（Real-time fluorescence quantitative PCR，RT-qPCR）试剂盒购于日本TaKaRa公司，miR-222-3p inhibitor、pcDNA 3.1-PTEN和1%青霉素-链霉素购于美国Thermo Fisher Scientific公司，全蛋白提取试剂盒购于美国……