李晓辉,瞿紫微,卢 昕,孟庆彬,陈华涛,任 骏,谭成沛

（1.湖北省武汉第一医院胃肠外科，湖北 武汉430022；2.湖北省神农架林区中医医院普外科，湖北 神农架442000）

骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是一种具有高度自我更新和多向分化能力的成体干细胞，已成为组织修复和器官重建的重要种子细胞，基于MSCs的细胞治疗方法已在临床上得到了广泛应用，但研究［1-3］显示：干细胞移植的修复作用主要通过旁分泌方式进行。MSCs是制备外泌体的常用细胞来源之一，分泌的外泌体内富含独特微小RNA（microRNA，miRNA）和转移RNA（transfer RNA，tRNA），以囊泡的形式与细胞膜融合后分泌至细胞外，与靶细胞融合后将内容物释放至靶细胞的细胞质中影响细胞信号传导，因此外泌体常被用作药物或肽载体来治疗疾病［4-6］。研究［6-7］显示：MSCs旁分泌在肠道内损伤和组织病变的研究中具有重要价值。外泌体包被的miRNA被认为是一种新型的生物标志物，可用于结直肠癌的诊断和预测［8］。研究［9］显示：miR-196b-5p可调控结直肠癌细胞的转移和侵袭。本课题组前期研究［10］显示：携带miR-196b-5p的MSCs来源外泌体对结肠癌细胞的耐药性具有一定影响。为了阐明携带miR-196b-5p的外泌体对结肠癌细胞生物学特性的作用，本研究分离小鼠骨髓来源的MSCs，经过miR-196b-5p模拟物（miR-196b-5p mimic）和miR-196b-5p抑制物（miR-196b-5p inhibitor）转染后收集培养液，分离出外泌体并干预小鼠结肠癌CT 26.WT细胞，观察细胞增殖、凋亡和迁移等生物学行为的变化。

1 材料与方法

1.1 实验动物、细胞、主要试剂和仪器8只健康4周龄BALB/c小鼠，体质量15～16 g，动物生产许可证号：SCXK（京）2016-0002，动物使用许可证号：SYXK（鄂）2018-0104。……