巩 培,刘竟然,赵世敏,王玉珍,谢基明

（1.内蒙古农业大学生命科学学院生物制药工程系，内蒙古 呼和浩特010108；2.内蒙古自治区人民医院检验科，内蒙古 呼和浩特010020）

微小染色体维持蛋白（mini-chromosome maintenance protein，MCM）是近年来发现的一组反映细胞增殖的标志物。MCM包括MCM 2～10这9种进化高度保守的家族蛋白，是DNA复制过程中的通行证，控制细胞周期从G1期向S期进展［1-2］。MCM只在处于增殖活动周期的细胞中表达，其不表达意味着细胞退出增殖周期成为成熟细胞或细胞进入G0期［3］。MCM在恶性肿瘤中高水平表达，是细胞增殖活性的新指标，对于肿瘤的早期诊断和预后有重要意义［4］。研究［5］显示：MCM 2在恶性乳腺组织中高表达，该标记物的诊断意义优于肿瘤增殖标记物Ki67。MCM 2、MCM 4、MCM 5、MCM 6、MCM 7和MCM 10在宫颈组织中高水平表达，且MCM 4、MCM 6和MCM 10的表达水平与肿瘤进展呈正相关关系［6-7］。MCM 2、MCM 4、MCM 8和MCM 10的过表达与胰腺癌的不良预后有关［8］。最新的研究［9］显示：MCM 10在DNA复制的延伸和维持基因组稳定性方面均发挥不可或缺的作用，且MCM 10的高表达水平与尿道上皮细胞癌的进展和预后呈强相关关系。但MCM 10在乳腺癌细胞的病理生理过程中的作用目前尚无相关报道。本研究采用慢病毒干扰MCM 10，探讨MCM 10干扰对乳腺癌MDA-MB-23细胞的增殖和凋亡的影响及其机制，为乳腺癌的靶向治疗提供依据。

1 材料与方法

1.1 细胞、主要试剂和仪器人乳腺癌细胞MDAMB-231购自美国模式培养物集存库（American Type Culture Collection，ATCC）。DMEM培养基购自美国Invitrogen公司，Ausbian胎牛血清（fetal bovine serum，FBS）购自上海威正翔禹生物科技有限公司，BCA试剂盒和细胞凋亡检测试剂盒均购自上海碧……