miR-146b对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺组织中ICAM-1表达的调控作用
2021-06-04龙光文杨秀林吉春玲董裕康
龙光文,张 谦,杨秀林,吉春玲,董裕康
(贵州省人民医院急诊内科,贵州 贵阳550002)
急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)是重症监护病房患者常见的急性肺损伤并发症,可引起严重的全身炎症并导致多器官功能障碍和高死亡率[1]。目前,开发新的治疗方法加强肺修复仍是治疗该病的关键。微小RNA(microRNAs,miRNAs)作为非编码微小单链RNA分子,参与呼吸系统的疾病进展过程[2]。miR-146b通过抑制MyD88/NF-κB信号通路减轻肺炎患儿肺组织的炎症损伤[3]。miR-146b过度表达可有效改善脂多糖诱导的急性肺损伤[4],说明miR-146b对不同病因引起的肺组织损伤具有一定的治疗作用。此外,细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)作为一种细胞表面黏附受体,可促进受炎症过程影响的组织中多个效应器/靶细胞相互作用,参与ARDS疾病进程,并在ARDS患者血清中高表达[5]。在ARDS小鼠模型中,抑制ICAM-1表达有助于改善肺部炎 症[6]。研究[7]显示:miR-146抑制 剂对白细 胞 介 素1β(interleukin-1β,IL-1β) 诱 导 的ICAM-1表达具有明显促进作用,说明miR-146对炎症条件下ICAM-1表达具有一定的调控能力,但miR-146b是否通过调控ICAM-1表达缓解ARDS患者肺组织损伤尚未明确。本研究通过过表达miR-146b干预ARDS大鼠,检测其对肺组织中ICAM-1表达水平的影响,探讨miR-146b对ARDS大鼠肺组织损伤的作用,为ARDS的治疗提供潜在靶点。
1 材料与方法
1.1 实验动物、细胞、主要试剂和仪器健康雄性8周龄SD大鼠60只,体质量220~250 g,购自贵州医科大学实验动物中心提供,实验动物生产许可证:SCXK(黔)2018-0001。HEK-293T细胞(美国保藏中心ATCC)。agomir-NC、miR-146b agomir、miR-146b mimic和mimic-NC(广州锐博生物科技有限公司),油酸(湖南长沙恒昌化工有限公司),转染试剂Lipofectamine 3000(美国Invitrogen公司),TRIzol试剂(上……