光路系统的优化配置在多色流式细胞术实验方案设计中的应用
2021-06-04付伟超梁昊岳于文颖王浩雨刘二涛高瀛岱
付伟超,梁昊岳,于文颖,王浩雨,刘二涛,高瀛岱*
(1.北京协和医学院,中国医学科学院血液病医院,中国医学科学院血液学研究所,实验血液学国家重点实验室,国家血液系统疾病临床医学研究中心,天津300020;2.天津市血液病基因治疗研究重点实验室,天津300020)
0 引言
流式细胞术(flow cytometry)是一种通过流式细胞仪对单个细胞或颗粒进行多参数分析、分选的技术,在血液学、免疫学和干细胞与再生医学等领域具有重要作用[1-2]。光路系统是常规流式细胞仪的核心部件,决定着仪器检测能力的高低,其主要由激光器和滤光片等元件组成,分别用于激发和接收相应的光信号[1-5]。光路系统中,激光器种类和数量较为固定,需根据仪器型号由厂家进行升级,但光路收集系统不是固定的,各种型号的滤光片可根据实验需要进行调配和更换。BD AriaⅢ流式细胞仪采用空间激发模式,光路收集系统采用八角形和三角形接收装置,每个激光器都有单独的接收装置。光信号被各种型号的滤光片分割,同时被相应的光电倍增管(photomultiplier tube,PMT)(作为荧光通道)接收,以达到荧光检测的目的[1-3,6-7]。
活性氧(reactive oxygen species,ROS)是细胞内正常代谢产生的含氧化合物,主要由线粒体产生。在正常生理条件下,ROS的产生和消除是一个动态平衡过程,在细胞信号介导、细胞周期和基因表达等过程中发挥着重要作用[8-9]。同时,高浓度ROS会诱导细胞中的氧化应激,导致细胞衰老和凋亡[8-9]。造血干祖细胞(hematopoietic stem and progenitor cell,HSPC)广泛存在于哺乳动物骨髓、脐带血和外周血中,在机体正常造血调控机制中发挥着十分重要的作用[10-13]。……
