黄 振，侯有明 ，郭琼霞 ，陈韶萍,

（1. 福建农林大学植物保护学院，福建 福州 350002；2. 福州长乐机场海关，福建 福州 350209；3. 福州海关技术中心，福建 福州 350001）

0 引言

【研究意义】南瓜实蝇Bactrocera tau（Walker），属双翅目Diptera、实蝇科Tephritidae、果实蝇属Bactrocera[1]，是我国进境植物检疫性害虫。卵、幼虫、蛹能随寄主如果蔬、土壤、包装物等可进行远距离传播。南瓜实蝇食性杂、寄主广，达16个科80余种[2]，主要危害南瓜、角瓜、丝瓜、黄瓜、葫芦、苦瓜、桑椹、西瓜、菠萝蜜、杨桃、芒果、番石榴、番茄、扁蒲、菜豆等瓜果植物，对葫芦科植物危害尤为严重[3]。Walker1849年首次在中国报道[4]，目前主要报道分布在越南、缅甸、泰国、老挝、日本、柬埔寨、马来西亚、菲律宾、新加坡、不丹、斯里兰卡、印度、印度尼西亚等地[5−6]。国际果蔬贸易给南瓜实蝇的传入传播带来了极大的潜在风险[7]，日常分类鉴定工作通常以成虫外部形态特征作为分类鉴定依据，而日常检疫中经常截获幼虫、卵或蛹，甚至翅、足等残体，无法快速、准确鉴定，通常是在实验室内饲养为成虫后进行鉴定，耗时较长，严重影响果蔬进出口贸易的通关速度。因此，建立快速、特异、有效的PCR技术，对快速鉴定南瓜实蝇具有重要的现实意义。【前人研究进展】采用分子生物学的方法开展昆虫种类鉴定，可以解决通过传统形态特征不能进行实蝇种类鉴定的问题。越来越多的分子鉴定技术被运用于昆虫的鉴定[8]。Mun等[9]应用限制性内切酶Apa I、Nhe I和Sac I，将南瓜实蝇、桔小实蝇和地中海实蝇等4种实蝇区分开来。吴佳教等[10]用PCR-RFLP技术对我国口岸截获频率较高的9种检疫性实蝇开展了研究，用限制性内切酶MSE1和DRAI对PCR扩增产物进行酶切，用得到的酶切位点将供试的9种实蝇区分开来。……