王鲁敏,肖翠平

(烟台大学化学化工学院,山东 烟台 264005)

海绵(Marine sponge)是地球上最原始的无脊椎动物,其独特的空腔结构和滤食性生活方式,使其拥有“微生物资源库”的美誉[1]。近年来,越来越多的研究表明从海绵中分离得到活性物质需要微生物参与,有的甚至由微生物直接产生[2-4]。目前海洋微生物次级代谢产物已逐步形成系统的研究体系,从海洋微生物中分离得到的化合物数量正在急剧增加[5]。近年来研究人员从海洋真菌中分离得到了大量结构新颖的化合物,这些化合物往往具有广泛的生物活性,如:抗病毒[6]、抗肿瘤[7]、抗污损[8]等。本文以分离自黄渤海潮间带繁茂膜海绵(Hymeniacidonperleve)的一株共附生真菌Penicilliumsp.YZ-7为研究对象,对其次级代谢产物进行分离纯化,分离得到9个化合物(结构式见图1),并以海洋污损细菌为抗污损活性筛选模型对化合物进行抗污损活性初步评价。

图1 化合物1—9的结构式

1 实验部分

1.1 仪器试剂

超导核磁共振波谱仪AVANCE III 500(德国Bruker公司;高分辨质谱仪P776(美国Waters公司);旋转蒸发仪R206(上海申生科技有限公司);ODS反相硅胶(日本YMC公司);Sephadex LH-20凝胶(美国GE公司);氘代试剂(Cambridge Isotope Laboratories, Inc.);其他有机试剂均为分析纯(国药集团化学试剂有限公司)。

1.2 菌株分离与培养

分离鉴定:菌株YZ-7通过组织接种法分离自黄渤海潮间带繁茂膜海绵Hymeniacidonperleve,经ITS序列比对及形态学分析,确定种属为Penicilliumsp.。菌种保存于中国科学院烟台海岸带研究所生物学与生物资源利用重点实验室-80 ℃冰箱。

菌株培养:取适量冻存在-80 ℃的50%甘油中的菌种于装有20 mL培养基的50 mL三角瓶中,28 ℃摇床震荡培养48 h获得种子培养液。……