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吲哚胺2,3-双加氧酶在哮喘小鼠肺组织的表达及与γ干扰素的关系

2021-05-24许春娜李晓汤昱张磊王秀芳

中国中西医结合儿科学 2021年2期
关键词:小鼠水平

许春娜,李晓,汤昱,张磊,王秀芳

支气管哮喘(简称哮喘)是一种慢性的气道炎症性疾病,具有异质性的特点。对国内外儿童群体研究中发现,哮喘患病率是逐年增高的,这将给患儿家庭及社会带来沉重的负担[1],吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)在人和动物的组织中低水平表达,为色氨酸代谢的限速酶。色氨酸在参与变态反应性疾病发生过程中起关键作用[2],是免疫耐受机制的重要参与者,IDO作为色氨酸的限速酶,其表达水平有重要意义[3]。γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)具有免疫调节、抗病毒等多种活性,其是由分泌蛋白质组成[4]。通过调控嗜酸性粒细胞、肥大细胞等细胞活性参与呼吸道病情进展过程[5]。Ünüvar等[6]在对过敏性疾病的研究中证实,IDO随着IFN-γ的刺激而增加。故本文检测小鼠肺组织中IDO、IFN-γ的水平,阐述其在哮喘小鼠体内的表达及相关关系。

1 材料与方法

1.1 实验动物 选择6周龄SPF级雌性BALB/c小鼠21只,体质量18~23 g,由河南省实验动物中心提供,生产许可证号SCXK(豫)2010-0002。

1.2 试剂 尘螨提取物(丹麦ALK公司),Anti-Indoleamine 2,3-dioxygenase antibodyab(ABCAM公司),eECL Western Blot Kit试剂盒(北京康为世纪生物科技有限公司),ELISA试剂盒(上海森雄科技有限公司)。

1.3 小鼠哮喘模型的建立及实验分组 按随机数字表法将21只小鼠分为对照组、干预组、哮喘组3组,每组7只。哮喘组及干预组小鼠致敏:将含2 000 U/mL的尘螨提取液100 μL(每毫升尘螨提取液中氢氧化铝含2%)第1天皮下注射,第3、5、7天腹腔注射,将含4 000 U/mL的尘螨提取液50 μL于第9、11、13天腹腔注射;对照组小鼠以相同方法、相同剂量生理盐水替代致敏。哮喘组小鼠激发:先用0.3%戊巴比妥0.3 mL以腹腔注射的方法麻醉小鼠后以含4 000 U/mL尘螨提取液50 μL/次于第15、16、17天滴鼻激发小鼠,每日1次。……

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