周明夏 钱捷 顾长青

摘要：为开展大肠杆菌分离株临床常用药物敏感性研究，对从江苏省不同地区养鸡场分离到的139株大肠杆菌进行了药物敏感性检测。结果显示，139株大肠杆菌分离株对氨苄青霉素、磺胺甲基异噁唑、庆大霉素、四环素、诺氟沙星、卡那霉素、链霉素、先锋IV等13种抗生素的耐药率超过了50%，尤其是对强力霉素、氨苄青霉素、四环素、链霉素、磺胺甲基异噁唑及先锋IV的耐药性都超过了90%。泰州地区黄羽肉鸡大肠杆菌耐药性性非常严重，只有阿奇霉素、诺氟沙星、左旋氧氟沙星中度敏感或敏感，临床治疗试验表明诺氟沙星对该地区的大肠杆菌病起到了很好的控制作用。该试验为江苏省部分地区防治鸡大肠杆菌病提供了一定的用药参考。

关键词：禽致病性大肠杆菌（APEC）;药敏试验;耐药性

中图分类号：S858.31        文献标识码：A        文章编号：1007-273X（2021）02-0005-02

在家禽饲养中，禽大肠杆菌病是一种比较常见的疾病，该病主要由禽致病性大肠杆菌（APEC）引起，临诊病型主要有肉芽肿、大肠杆菌性败血症、气囊炎、肿头综合征、腹膜炎及输卵管炎和黄囊感染等，不仅传播速度快，而且传播范围非常广，发病率一般高达11%～69%，死亡率一般在3.8%～20.0%[1]，对我国养禽业的发展造成了严重的影响。目前针对大肠杆菌一般采用药物和疫苗进行控制，临床上鸡大肠杆菌一般用药物进行预防和治疗[2]，为更合理地防治该病，要进行药敏试验并注意交替轮换使用药物，避免病原菌产生抗药性[3]。本研究以在江苏省不同地区分离到的黄羽肉鸡139株大肠杆菌分离株为试验菌株，对菌株针对15种常用药物敏感性进行研究，同时对其发展趋势进行分析，从而为禽大肠杆菌病临床用药提供试验数据参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源 试验菌株为从江苏省不同地区（南通、泰州、常州）养鸡场分离到的139株大肠杆菌菌株。

1.1.2 培养基 LB培养基，OXOID公司;琼脂粉，中国国药（集团）上海化学试剂公司。

1.1.3 药敏纸片 氯霉素（30  μg/片）、阿奇霉素（15 μg /片）、链霉素（10 μg /片）、四环素（30 μg/片）、诺氟沙星/氟哌酸（10 μg /片）、庆大霉素（10 μg /片）、卡那霉素（30 μg /片）、头孢拉定/先锋IV（30 μg /片）、左旋氧氟沙星（5 μg /片）、氟苯尼考（30 μg /片）、氨苄青霉素/氨苄西林（10 μg /片）、强力霉素/多西环素 （30 μg /片）、多粘菌素B（300 IU）、磺胺甲基异恶唑（300 μg /片）、新霉素（30 μg /片）均从杭州微生物试剂有限公司购入。

1.1.4 试验黄羽肉鸡场养殖和临床发病情况 选取泰州市某正在发生大肠杆菌病的黄羽肉鸡场2个，养殖场1的养殖情况：养殖量4 800羽，35日龄，用药前病鸡数量245羽，用药前死亡57羽。养殖场2的养殖情况：养殖量4 500羽，32日龄，用药前病鸡数量156羽，用药前死亡36羽。

1.2 方法

1.2.1 药敏试验 根据美国国家临床实验室标准委员会（National committee for clinical laboratory standards，NCCLS）2007年发布的标准选择抗生素和进行实验与判定。

1.2.2 治疗给药方法和疗效评价标准 选取敏感药物，集中给药和饮水，全天药物分别于上午、下午2次进行集中投药，按照1 g药加 5 kg水的比例连续投药3 d，期间如出现死亡，进行大肠杆菌分离培养，阳性则判断为感染死亡;投药后鸡群不再死亡、食欲及精神恢复正常，大肠杆菌病临床症状消失则视为治愈。根据死亡鸡只数计算死亡率，结束后根据实际治愈数量计算治愈率[4]。

2 结果与分析

本次试验使用15种抗生素检测139株APEC分离株药物敏感性，具体结果见表1。15种供试抗生素中，APEC分离株对其中13种（四环素、磺胺甲基异噁唑、庆大霉素、氯霉素、诺氟沙星、卡那霉素、新霉素、氨苄青霉素、先锋IV、左旋氧氟沙星、氟苯尼考、强力霉素、链霉素）耐药性高于50%，特别是对氨苄青霉素、四环素、先锋IV、磺胺甲基异噁唑、强力霉素、链霉素的耐药率均已超过90%。

根据本次药敏试验结果判断，30株南通地区分离出来的大肠杆菌中，大部分对强力霉素、氨苄青霉素、氯霉素、四环素、链霉素、先锋IV、磺胺甲基异噁唑等耐药，对多粘菌素等敏感度为中等，对庆大霉素敏感度较高。66株常州地区分离的大肠杆菌对多粘菌素敏感度较高，对其他药物的敏感性较低或耐药，尤其是氨苄青霉素、四环素、先锋IV、强力霉素、磺胺甲基异噁唑等均为100%耐药性。43株泰州地区分离的大肠杆菌对四环素、强力霉素、先锋IV、磺胺甲基异噁唑、链霉素、氯霉素、氨苄青霉素、新霉素、庆大霉素、卡那霉素、氟苯尼考、多粘菌素等表现出耐药性;其中多数菌株对诺氟沙星、左旋氧氟沙星及阿奇霉素為中度敏感或敏感，根据此结果，泰州地区鸡场临床用药可选择诺氟沙星，其治疗结果见表2。结果显示，泰州市2个养殖场用药后死亡率分别为 0.65%、0.44%，死亡率明显降低，说明诺氟沙星对大肠杆菌病发挥了理想的治疗效果。

3 分析与讨论

本次药敏试验的 139 株大肠杆菌菌株分别从南通、常州和泰州感染大肠杆菌病的病例中分离而来，结果显示，目前该地区禽致病性大肠杆菌已经表现出相当突出的耐药性，在选择药物预防和治疗禽大肠杆菌病的范围越来越窄，以前治疗表现较好的药物目前已很难保证疗效能够继续保持，通过研究某一地区鸡源性大肠杆菌耐药性，能够进一步明确该地区细菌耐药性现状，有利于更好地对鸡大肠杆菌病防治药物进行筛选，从而指导实际生产[5]。因此本试验结果具有一定临床参考价值。

本次试验根据抗菌药所属类别、针对的细菌类型和临床使用情况，选定了15 种抗生素，这些抗生素在针对革兰氏阴性菌感染方面都具有一定的代表性。试验结果显示，大肠杆菌在临床上耐药现象已十分严重，这将会严重影响到家禽养殖业的发展。因此有必要大规模普查临床大肠杆菌耐药情况，从而对临床用药进行相应的指导。如果在临床实际用药中能够进行交叉、联合、轮替用药，提高治疗疗程的合理性，就能够有效降低大肠杆菌出现耐药性的机率，从而使防治效果得到提升。

本次临床治疗试验证明，诺氟沙星对该场大肠杆菌病起到较好的控制效果，证明药敏试验结果与临床治疗效果符合，但临床方面仍要注意诊断结果的准确性及药品用法、用量和疗程的正确性等，避免出现耐药性。

参考文献：

[1] 陈 祥，高 崧，焦新安，等. 禽病原性大肠杆菌的致病机理[J].中国家禽，2007， 29（18）：54-57.

[2] BOGAARD A . Colibacillosis in poultry[J]. Tijdschr diergeneeskd，1992， 117（4）：124-125.

[3] 郝智慧，肖希龙，邱 梅，等.不同区域鸡大肠杆菌对抗菌药的耐药性比较[J].中国兽医科学，2009，39（1）：84-88.

[4] 王宝杰.潍坊市肉鸡大肠杆菌病的流行病学调查及药物防治研究[D].山东泰安：山东农业大学，2008.

[5] 周廷宣，冉茂菊.鸡致病性大肠杆菌药敏实验[J].中国畜禽传染病，1995 （2）：57-58.