●郑登勇 阮杏林 王建挺 丘余良 阮诗玮▲

环孢素A（cyclosporine A，CsA）目前广泛用于治疗实体器官移植及自身免疫性疾病，显著延长了移植器官的存活时间和患者的生命，但CsA的急慢性肾毒性制约其临床应用[1]。急性肾毒性与CsA损伤血管内皮细胞，导致肾血管收缩，肾脏血流灌注不足，肾小球滤过率下降有关；慢性肾毒性与CsA上调转化生长因子-β(TGF-β)，引起肾小管上皮细胞转分化、肾间质纤维化有关[2]。目前尚无肯定的可应用于临床的减轻CsA肾毒性的药物[3]。

中医认为，环孢素A 肾损伤系药毒伤肾，导致脾肾亏虚为本，湿浊血瘀为标[1,4]。益肾降浊汤系福建省名中医阮诗玮教授治疗慢性肾功能衰竭的经验方，临床已使用30 余年，疗效良好。益肾降浊汤“益肾健脾、降浊化瘀”之功效契合环孢素A肾损伤的病机，故课题检测益肾降浊汤对环孢素A诱导HK-2细胞损伤细胞活力的影响。鉴于中药复方成分复杂以及作用的多靶点，机制研究采用转录组测序(transcriptome sequencing，RNA-seq)技术分析益肾降浊汤治疗CsA 诱导HK-2 细胞损伤的差异表达基因，探讨益肾降浊汤减轻CsA肾毒性的可能靶点。

1 实验材料

1.1 实验细胞HK-2 细胞株（购自中国科学院细胞库）。

1.2 益肾降浊汤益肾降浊汤由太子参15 g、生黄芪30 g、生白术15 g、茯苓15 g、槲寄生15 g、怀牛膝15 g、桑椹15 g、丹参30 g、当归10 g、大黄9 g、六月雪15 g、车前子15 g、陈皮10 g 组成，所有中药饮片购自福建中医药大学附属人民医院中药房。浓煎为1.0 g/mL。YSJZT 用0.22 μm 无菌滤器过滤,分装放置-80 ℃冰箱保存备用。

1.3 主要试剂及仪器环孢素软胶囊(新山地明，批准文号J20140116，诺华制药)。……