夹脊电针对急性脊髓损伤大鼠脊髓组织P2X7R、NLRP3蛋白表达的影响*

2021-05-13梅继林田秀燕孙忠人

针灸临床杂志 2021年4期

关键词：实验

梅继林，田秀燕，孙忠人

(1.黑龙江中医药大学，黑龙江哈尔滨 150040; 2.黑龙江中医药大学附属第二医院，黑龙江哈尔滨 150001)

脊髓损伤(ASCI)是临床常见的突发机械性损伤导致不可逆的运动、感觉和自主神经功能损伤，给患者和家庭以及社会带来巨大的压力和负担。脊髓损伤目前是无法治愈的，最大限度的减少脊髓损伤后继发性并发症和增加残余功能是临床治疗重点[1-3]。现有的临床研究数据表明，电针夹脊穴对脊髓损伤有显著疗效[4-7]。P2X7R是一种ATP门控型离子通道，参与了细胞的多种病理生理过程[8-9]；NLRP3是当前研究中分析最透彻的Nod样受体家族成员，也是NLRP3炎症小体的受体蛋白[10]。细胞外ATP和P2X7R相结合产生寡聚化反应，使离子通道开放，进而激活NLRP3炎症复合体[11-12]。发生急性脊髓损伤后，大量的ATP通过损伤细胞作为趋化信号，致使P2X7R表达增加，NLRP3各组分表达测量结果升高，从而加重脊髓组织神经损伤[13]。综上，在治疗脊髓损伤过程中，核心思想是抑制NLRP3炎症小体活化和降低P2X7R表达。本实验选择夹脊电针治疗急性脊髓损伤大鼠，通过观察治疗后P2X7R、NLRP3等蛋白和基因表达的演化，以期获得相关治疗机制，为急性脊髓损伤的康复治疗提供合理的实验数据和理论支持。

1 材料

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器荧光定量PCR仪(Exicycler 96，韩国)；离心机(H-2050R，长沙，中国)；电泳仪(DYY-7C，北京)；电针治疗仪(KWD-808-Ⅱ型，英迪，中国)；针灸针(0.35 mm×13 mm华佗，中国)；镜拍照系统(OLUMPUS，DP73，日本)。

1.1.2 试剂 P2X7R(A10511，ABclonal，中国);NLRP3(WLH3383，wanleibio，中国);BCA蛋白浓度测定试剂盒(WLA004，wanleibio，中国);PVDF膜(IPVH00010，Millipore，美国);ECL发光液(WLA003，wanleibio，中国)。