李 倩，韩艳丽，宁日波，袁 备，王浩楠，徐送宁

沈阳理工大学理学院，辽宁 沈阳 110159

引 言

水在人类正常的生产生活中起着不可替代的作用，随着工业化进程的加快，水污染已成为当今世界最严重的环境问题之一。水体重金属污染因其富集和不可降解的性质，直接危害人类的健康和经济的可持续发展，因而水体重金属污染检测成为全世界科研工作的研究热点。现常见的检测手段虽然灵敏度高，检测限低，但实验装置昂贵、体积大、样品预处理程序复杂、难以实现原位分析。激光诱导击穿光谱(laser induced breakdown spectroscopy,LIBS)是利用聚焦高功率密脉冲激光照射于物质上，产生瞬间等离子体，并对辐射出的元素特征谱线进行定性及定量分析的元素发射光谱技术。由于其成本低，结构紧凑、不需要或很少的样品制备、分析快速、操作简单易于实现现场分析的优势在合金成分分析[1]、土壤污染物检测[2]、医药分析[3]、文物考古[4]等固相基质元素分析领域得到了广泛应用。

与固相基质不同，LIBS在液相基质的元素分析中遇到了一些困难，如产生气泡、液体飞溅、等离子体寿命短等，从而影响了分析性能和实验的可重复性。为了克服上述缺点，LIBS研究人员提出了以下几种改进方法：一是通过增加重新激发或进样实验装置，如：双脉冲[5]、射流装置[6,7]、雾化装置[8]、微液滴分配装置[9]等。这些方法不仅增加了实验的复杂性程度，同时双脉冲仅限于测量中得到高浓度的样品；射流、雾化微液滴分配器等装置由于装置容易堵塞且清洗过程繁复限制了原位分析。二是将溶液速冻为固态[10]，由于样品在室温下物理性质不稳定使得LIBS测量的准确性难以保证。三是渗透性材料载体富集法，常用的富集材料有滤纸[11]、木片[12]、蒙脱石[13]、脱水碳[14]、螯合树脂[15]等，这些材料存在基质本身含有杂质元素较多、制备程序复杂和样品均一性差等缺点。为了充分发挥LIBS技术的优势，寻找一种成本低、制备方法简单的转换材料成为LIBS技术在水体重金属污染物检测中的一个重要突破口。

利用明胶水溶液的热可逆凝胶性，热的明胶水溶液冷却后形成可逆性物理凝胶，基于明胶水凝胶固化方法对硫酸铜溶液中的铜元素进行LIBS检测。明胶水凝胶固化方法克服了激光与液体表面耦合差液体飞溅和表面冲击波缺点，从而提高LIBS检测的灵敏度，且制备方法简单、样品均一性好、固化材料廉价易得、室温下物理性质稳定、操作简单、不需要增加实验装置，从而提高了表面的均匀性、实验结果的可重复性。本工作主要研究铜等离子体谱线强度随明胶与硫酸铜溶液质量比例的变化关系，获得最佳的明胶硫酸铜溶液质量比例，在最佳的明胶硫酸铜溶液质量分数比条件下，研究激光诱导击穿水体中铜元素的光谱特性与检测限，与其他研究结果相比较，分析明胶水凝胶固化方法在水体重金属检测分析中的优势。

1 实验部分

1.1 装置

明胶水凝胶激光诱导击穿光谱实验装置如图1所示，采用调Q脉冲Nd∶YAG激光器作为激光光源，输出波长1 064 nm，脉宽8 ns，重复频率3 Hz。通过衰减器控制能量，激光束经石英透镜Lens(f=100 mm)聚焦到明胶水凝胶样品表面。将样品固定在三维位移平台上并调整，使得每个激光脉冲作用在明胶水凝胶样品表面的不同位置，激发产生的等离子体辐射光由Andor收光装置收集，通过光纤耦合到光谱仪(Andor,SR-750-A-R spectrometer)，收光狭缝宽度为0.06 mm，光栅密度为1 800 l·mm-1。使用ICCD(Andor,iStar DH3)触发激光器同时对光谱仪分光信号进行处理，采集门宽30 μs。Andor Solis系统增益为1 500，对LIBS激发的光谱进行采集及降噪处理。

图1 LIBS实验装置图Fig.1 LIBS experimental setup

1.2 样品制备

实验所用吉利丁片购于青海益洁生物工程有限公司，蛋白质含量83.8%，钠含量0.218%。吉利丁又称明胶，是一种由不同长度聚合物链组成的混合物，是食品中常见的增稠剂和分散剂。凝胶性是明胶的最主要的特征之一，热的明胶水溶液在冷却后会形成物理凝胶。实验以化学分析纯硫酸铜为化合物溶质，加入去离子水配置成浓度为512 mg·L-1的标准溶液，逐步稀释以取得不同浓度的Cu的标准溶液。将200 mL的硫酸铜溶液倒入烧杯中，加入一定量明胶，静置6 min，烧杯放入超声波清洗机中，温度50 ℃，超声波持续振动15 min，取出烧杯后用玻璃棒将吉利丁硫酸铜混合溶液搅拌均匀，并量取50 mL混合溶液倒入高2.5 cm、直径5.5 cm的聚苯乙烯容器中，在温度10～15 ℃下静置12 h，形成表面光滑均匀介于液体与固体之间的凝胶固体。

2 结果与讨论

2.1 分析线的选取

实验中Nd∶YAG激光器脉冲能量控制为100 mJ，延迟时间3.4 μs。明胶质量分数为2.5%的铜离子浓度为64 mg·L-1的硫酸铜溶液和去离子水固化光谱对比如图2所示。

图2 铜溶液凝胶与水溶液凝胶对比图Fig.2 Spectral comparison of copper solution gel and aqueous gel

从图2可以看出，铜元素对应的特征谱线Cu Ⅰ 324.7 nm和Cu Ⅰ 327.4 nm谱线强度较高，且几乎不受明胶基质本身干扰，所以在实验中选择这两条谱线作为铜元素含量分析谱线。

2.2 明胶浓度对光谱强度的影响

当明胶与溶液的比例足够大时，低温下老化一定时间后明胶水溶液即转变为凝胶。明胶与液体样品的含量对凝胶强度有很大影响，过低的明胶与溶液比例会削弱凝胶强度，导致液体飞溅和等离子猝灭，而过高的明胶与溶液比例提高凝胶强度的同时也提高了凝胶化温度，导致凝胶的击穿阈值提高，因此明胶与溶液的比例将影响激光烧蚀率和光谱强度。在激光能量为100 mJ、铜离子浓度为64 mg·L-1、延时3.4 μs的实验条件下，用Cu Ⅰ 324.7 nm和Cu Ⅰ 327.4 nm两条分析线数据结果对明胶与液体样品的混合比例进行优化。分别选取明胶与溶液的比例含量为1.25%，2.50%，3.75%和5.00%进行实验，获得了明胶与溶液比例对光谱强度的影响曲线，如图3所示。

图3 明胶浓度对光谱强度的影响(a)：加明胶(2.5%)前后光谱对比图；(b)：Cu特征谱线强度随明胶质量分数的变化；(c)：Cu特征谱线SBR随明胶质量分数的变化Fig.3 Effect of gelatin concentration on spectral intensity(a)：Comparison of spectra before and after adding gelatin (2.5%)；(b)：Change of Cu characteristic spectral line intensity with gelatin mass fraction；(c)：Change of Cu characteristic line SBR with gelatin mass fraction

直采硫酸铜溶液与投放质量分数为2.5%固化铜原子特征谱线强度对比如图3(a)所示，由图可见采用明胶固化明显提高了铜原子光谱强度和信背比，其中Cu Ⅰ 324.7 nm光谱强度增强了2.62倍，信背比增加了190.74倍，Cu Ⅰ 327.4 nm光谱强度增强了2.11倍，信背比增加了318.77倍。明胶水凝胶固化方法可以显著提高铜元素等离子体光谱发射强度主要原因在于是：采用直采方式检测，液体环境致使等离子温度降低、等离子体猝灭，同时高能激光击穿液体样品时，随之产生的水蒸气在液体表面上方迅速液化形成的液滴也会散射和吸收掉一部分激光能量和等离子体辐射。而采用明胶水凝胶方法，将原有的液体环境改变为固体环境，有效解决了等离子体温度低和等离子体猝灭对等离子体发射强度的影响，且由于明胶的亲水性，降低了水蒸气液化成小液滴对激光和等离子辐射散射和吸收的可能性。

明胶与溶液比例与光谱强度和信背比的关系如图3(b)和(c)所示。从图中可以看出，当明胶含量在0～2.5%时光谱强度和信背比随明胶含量的增加而迅速增加，在含量为2.5%时达到最大，随着明胶含量继续增加光谱强度和信背比逐渐减小。原因在于随着溶液中明胶含量的逐步增加，明胶硫酸铜溶液逐渐增稠，逐步减弱了等离子体温度低、等离子淬灭、水蒸汽散射激光能量等原因对水溶液中等离子体激发效果的影响，有效提高了等离子体光谱发射强度。当明胶含量达到2.5%时完全转化为固体，完成了由液体环境到固体环境的转变，使得光谱强度和信背比增加达到峰值。由于明胶溶液的凝胶化温度随着明胶溶液中明胶的质量分数的增加而升高，因此继续增加明胶浓度，使明胶溶液的凝胶化温度上升，相同的激光能量作用下样品的烧蚀量降低，光谱强度和信背比也因此降低。通过对明胶浓度的优化表明，明胶质量分数为2.5%是凝胶的最佳条件。

2.3 不同能量下铜元素的检测限

采用明胶水凝胶固化方法，以明胶质量分数2.5%为凝胶条件，按照1.2所述制备方法，分别制备了6种浓度(8，12，16，24，48和64 mg·L-1)硫酸铜标准溶液的明胶凝胶样品。在延迟时间为3.4 μs的条件下，分别采用100，80和60 mJ的激光能量对制备的6种浓度的硫酸铜标准溶液进行LIBS检测，为了降低因实验环境等原因给实验结果造成的误差，在同一实验条件下通过调节三维位移平台改变样品位置，使得每次激光脉冲作用于样品的不同位置，重复测量50次，剔除异常数据，筛选出光谱平均值附近比较平稳的光谱进行平均后的结果作为同一条件下的光谱数据，两条分析线Cu Ⅰ 324.7 nm和Cu Ⅰ 327.4 nm所建立的定标曲线如图4所示。

从图4可以看出，激光能量为100 mJ时，铜特征谱线强度与浓度的线性关系良好，Cu Ⅰ 324.7 nm的线性拟合系数达0.999，Cu Ⅰ 327.4 nm的线性拟合系数达0.997。这表明明胶水凝胶法应用于LIBS液体样品分析时具有良好的校准曲线线性。随着激光能量的增加，线性拟合系数增加，检测限降低，其主要原因在于随着激光能量的增加，样品的烧蚀量增加，样品烧蚀程度稳定，另外，离子强度也是影响明胶水凝胶凝胶化温度的重要因素之一；在能量较低时，激光能量不足以克服离子强度对明胶水凝胶凝胶化温度微小变化的影响，导致谱线强度与浓度的线性关系减弱。所以在用明胶水凝胶方法检测水体中重金属元素时，可以适当的提高激光能量以保证灵敏度改善检测限。

图4 不同激光脉冲能量下铜元素定标曲线Fig.4 Calibration curve for Cu spectral lines at different laser pulse energies

根据ICPAC定义，检测限(limit of detection,LOD)的计算公式为[16]

LOD=3σ/S

(1)

其中σ为光谱背景的标准偏差,S为定标曲线的斜率，具体数据列于表1中。

由表1可以看出，随着激光能量的降低，铜元素的两条分析线Cu Ⅰ 324.7 nm和Cu Ⅰ 327.4 nm的线性拟合系数R2减少，检测限LOD数值增大。在相同的能量下，Cu Ⅰ 324.7 nm线性拟合系数高于Cu Ⅰ 327.4 nm，检测限低于Cu Ⅰ 327.4 nm。这两条分析线对应的谱线能级变化参数由表2给出，这两条分析线均是铜原子被激发后由原子组态3d104p向3d104s跃迁产生的谱线，分别由4p(J=3/2,1/2)向4s(J=1/2)跃迁产生，其轨道角动量相同但总角动量不同，跃迁概率Aki分别为1.40×108和1.38×108s-1,Cu Ⅰ 324.7 nm的总角动量和能级跃迁概率均大于Cu Ⅰ 327.4 nm，总角动量和能级跃迁概率大的等离体辐射强度高，因此LIBS分析时优先选取Cu Ⅰ 324.7 nm。

表1 不同激光能量下铜元素的检测限Table 1 Detection limits of copper at different laser pulse energies

表2 Cu(Ⅰ)谱线能级参数Table 2 Spectral parameters of the Cu(Ⅰ) lines

2.4 不同检测方法检测限对比分析

LIBS相关工作者通过不同方式对水体中的铜元素进行检测并给出了检测限，通过文献的查阅获得射流、速冻、预富集、聚丙烯酸钠固化方法和明胶水凝胶方法与LIBS相结合测定液体样品中Cu Ⅰ 324.7 nm的检测限如表3所示。对比表3中检测限数据可以看出，采用本方法检测水体中的铜元素，在不增加实验装置的情况下操作简便，成本低、样品预处理程序简单，该方法应用于水体重金属检测，其检测限可以达到富集方法的检测水平。虽然相较于鳌合树脂富集方法的检测限还有一定差距，但明胶水凝胶固化方制样方法简单、样品均一性好、固化材料廉价易得。明胶水凝胶固化的方法结合LIBS技术为水体重金属检测提供了一种新型、简便、低成本、灵敏度高的检测方法。

表3 不同方法检测限对比Table 3 Comparison of detection limits

3 结 论

采用明胶水凝胶固化方法对硫酸铜溶液中的铜元素开展LIBS检测研究，实验用LIBS对明胶与溶液比例进行优化，得到最佳的明胶硫酸铜溶液质量比例为2.5%。在优化条件下，分别采用100，80和60 mJ的激光能量对硫酸铜溶液中的铜元素进行了定量分析，在激光能量100 mJ时，Cu Ⅰ 324.7 nm的定标曲线线性相关度R2达0.999，检测限为0.30 mg·L-1，达到了富集方法的检测水平。在LIBS检测中采用明胶水凝胶固化方法制备样品，能够有效克服激光烧蚀过程中样品表面波动，液体飞溅等缺点，从而增强了LIBS信号，充分发挥了LIBS技术操作简单、结构紧凑的优点又实现了原位分析。明胶原料便宜易得，明胶水凝胶固化样品制备方法为LIBS技术应用于水体重金属污染检测提供了一种新方法。