张舒纯，张 昕，李景云，池 霞，3，童梅玲*

1南京医科大学附属妇产医院（南京市妇幼保健院）儿童保健科，2医学研究中心，江苏 南京 210004；3南京医科大学儿科学院，江苏 南京 210029

多氯联苯（polychlorinated biphenyls，PCBs），作为一种常见的环境污染物，会对儿童的视觉发育造成影响。研究表明，误食PCBs污染的食物会导致子代出现眶周水肿、视力下降、视功能减低等表现［1-2］。前期实验表明，PCBs暴露可导致子代斑马鱼畸形率和死亡率明显升高，子代斑马鱼视网膜形态异常，导致其视动反应敏感性降低，抑制视网膜神经节细胞的增殖并促进其凋亡［3-4］，PCB1254可以通过抑制miR-182的表达来影响RGC-5细胞的增殖和凋亡［5］。然而，PCBs暴露导致视网膜尤其是神经节细胞发育异常的具体机制尚不明确。轴突导向因子-1（netrin-1，NTN1）作为一种神经轴突导向因子，在胚胎发育中发挥重要的调控作用。NTN1可通过介导视神经乳头，与视神经发育密切相关，其缺失会造成视神经乳头发育不良，细胞减少，视杯发育不全［6-7］。因此，本研究以视网膜神经节细胞RGC-5为研究对象，探讨NTN1在PCBs暴露致子代视网膜神经节细胞发育异常中的作用机制，从而为环境污染物暴露致子代视网膜发育异常的防治提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 材料

视网膜神经节细胞株RGC-5购自美国ATCC细胞库。DMEM高糖培养基、胎牛血清（fetal bovine serum，FBS）、青链霉素、0.25%胰酶（Thermo公司，美国）；PCB1254、Lip3000、聚凝胺（polybrene）（Sigma公司，美国）；ERK、p-ERK抗体和山羊抗兔辣根过氧化物酶标抗体（CST公司，美国）、GAPDH抗体（武汉三鹰生物技术有限公司）、β-actin和NTN1抗体（Abcam公司，美国）；CCK-8试剂盒（同仁公司，日本）；细胞周期检测试剂盒（苏州宇恒生物科技有限公司）；……