胡廷栋，王 蒙，刘晓蕊，杨海元，戴一凡，王 盈

江苏省异种移植重点实验室，南京医科大学医学遗传学系，江苏 南京 211166

肽基脯氨酰顺/反异构酶NIMA互作蛋白1（peptidyl-prolyl cis/trans isomerases，NIMA-interacting1，PIN1）能特异性识别磷酸化的丝氨酸/苏氨酸-脯氨酸（pSer/Thr-Pro）基序并与其结合，通过催化磷酸化底物的顺反异构来调节酶的活性、蛋白质的稳定性或目的蛋白的亚细胞定位。PIN1的表达受到严格的调控，其表达失调在许多病理状态下发挥着重要的作用，尤其是癌症及多种神经退行性疾病。在大多数癌症中PIN1呈高度表达状态并促进了癌症的发展，在多数神经退行性疾病中，PIN1表达却被下调［1］。据报道，PIN1激活超过50种癌症信号通路，并下调超过20种肿瘤抑制因子及生长抑制因子［2］。在神经元中，PIN1可抑制神经纤维缠结和β-淀粉样蛋白斑块的形成，从而阻止阿尔兹海默症的发生［3］。在神经干细胞的发育后期，PIN1通过抑制β-catenin的降解，调控成体神经干细胞（neural stem cell，NSC）的分化［4］。而在氧化应激或谷氨酸兴奋性毒性中，抑制PIN1的表达可促进神经细胞的存活［5］。这些结果表明PIN1在与氧化应激相关的神经系统疾病中发挥着重要的作用。

NSC具有高度的自我更新能力、多向分化潜能和迁移能力，当神经系统受到损伤，如神经退行性疾病、缺血缺氧损伤时，NSC可以增殖、迁移、分化为新生神经细胞，以代偿结构和功能损伤［6］。因此在NSC的体外培养条件下，对其分子调节机制、中枢神经系统疾病模型及神经组织工程的研究具有重要的价值［7］。CRISPR/Cas9基因编辑技术由于载体构建简单、靶向位点选择灵活等优点，被广泛用于各类细胞的基因编辑，通过CRISPR/Cas9技术对NSC特定基因进行编辑，可在体外揭示相关基因对NSC的影响及其功能，并为基因分析提供重要的依据。……