闫亚蕊，张松涛，龚文博，张润方，秦建武

(郑州大学附属肿瘤医院，河南 郑州 450008)

甲状腺癌是内分泌系统最常见的恶性肿瘤，发病原因包括遗传因素、电离辐射、碘摄入异常、自身免疫性疾病等，临床病理类型以乳头状癌和滤泡状癌为主，约占全部甲状腺癌的90%以上[1].从基因水平探讨甲状腺癌肿瘤发生、发展的相关机制是目前甲状腺癌的研究热点之一.近年来研究[2-5]发现：miR-221-3p、miR-125 b-5p等多种基因参与甲状腺癌的发生与发展，miR-429在乳腺癌、胃癌、肾透明细胞癌、卵巢癌中表达上调，但在甲状腺癌中表达及作用的相关报道较为少见.本研究通过细胞转染技术在体外下调甲状腺癌细胞SW579中miR-429的表达，探讨其对SW579细胞增殖、迁移的影响及可能的作用机制，从而为甲状腺癌的临床治疗提供新思路.

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

人甲状腺癌细胞(SW579细胞，广州赛库生物技术有限公司)；胎牛血清、胰蛋白酶、DMEM细胞培养基(友康恒业生物科技(北京)有限公司)；anti-miR-429质粒(上海晅科生物科技有限公司)；兔抗人MMP-2、MMP-9多克隆抗体、鼠抗人P21、CyclinD1、GAPDH单克隆抗体、HRP标记的羊抗兔IgG、羊抗鼠IgG(上海田源生物技术有限公司)；Trizol试剂、CCK-8试剂、Transwell小室(北京诺博莱德科技有限公司).

1.2 方 法

1.2.1 细胞培养与分组

在含10%胎牛血清、100 μg/mL链霉素、100 IU/mL青霉素的DMEM完全培养基中常规培养SW579细胞，设定细胞培养箱的环境为37 ℃、5%CO2，胰蛋白酶消化后进行传代.将传代后的细胞分为观察组、阴性对照组、空白对照组，其中，观察组SW579细胞转染anti-miR-429质粒，阴性对照组SW579细胞转染miR-429空载体质粒，空白……