杨柳，曹欢，孙东，侯宾，林玲，宋红丽（.天津医科大学一中心临床学院，天津3009；.天津市第一中心医院器官移植科，天津市器官移植重点实验室，中国医学科学院移植医学重点实验室，国家卫生健康委员会危重病急救医学重点实验室，天津3009）

心脏死亡器官捐献（donation after circulatory death， DCD）供肝经历较长时间的热缺血和缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury， IRI），静态冷保存（static cold storage， SCS）下，肝脏能量代谢和线粒体功能易于受损，对SCS 相关的IRI 特别敏感，应该限制暴露于SCS［1］。常温机械灌注（normothermic machine perfusion， NMP）模仿体内正常的代谢状态，很大程度上改善了DCD 供肝质量，优于SCS［2-3］。肝脏微循环结构和功能的变化在很大程度上影响着肝脏的生理功能，微循环障碍是导致肝脏损伤的决定因素［4-5］，本研究致力于探索NMP 对DCD 供肝的微循环的影响，研究其发挥保护作用的机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料：血管性血友病因子（von Willebrand factor， vWF）、血管细胞黏附分子-1（vascular cell adhesion molecule-1， VCAM-1）抗体购自美国圣克鲁斯公司；内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthetase，eNOS）抗体购自美国细胞信号技术公司；诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthetase，iNOS）、细胞间黏附分子（intercellular cell adhesion molecule-1， ICAM-1）抗体购自中国武汉三鹰公司；内皮素-1（endothelin-1，ET-1）抗体购自中国博奥森公司。选取6 ～ 8 周、200 ～ 220 g 雄性SD 大鼠（n ＝42）获取DCD 肝脏；实验动物由中国食品药品检定研究院提供，合格证号：SCXK（京）2017-0005。

1.2 实验方法

1.2.1 大鼠DCD 肝脏获取及肝脏NMP 系统建立：SD 大鼠麻醉后，腹部中央切口暴露肝脏，结扎左膈下静脉、右肾静脉、肾上腺静脉丛和肝动脉；游离门静脉并结扎幽门静脉及脾静脉，插入胆管支架。剪开膈肌夹闭胸主动脉、棉棒压迫心脏模拟心脏死亡过程；……