宋芳婷，李 冉，李闰婷，聂晓宁，侯 雯，张丽萌

(郑州师范学院分子生物学实验室，河南 郑州 450044)

0 引言

组织金属蛋白酶抑制剂(Tissue inhibitor of metalloproteinases，TIMPs)是金属蛋白酶的内源性抑制剂，在各种细胞中均有表达，主要作用于调节基质金属蛋白酶活性和抑制细胞外基质的转化，包括参与调节细胞增殖、细胞分化、侵袭及细胞凋亡等过程[1]。迄今为止哺乳动物TIMPs家族共有4个成员，包括TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3、TIMP-4，在结构上均具有2个结构域，其中TIMP1最初是以胶原酶抑制剂的形式在体外培养的人皮肤成纤维细胞、人血清以及牛软骨和兔骨中分离发现的，可抑制所有胶原酶的活性，是TIMPs家族中的一个重要基因[2-3]。

有研究显示，TIMP1基因能够作用于小鼠子宫和卵巢组织，从而参与调控小鼠的生殖周期，另外还可作为一种类固醇生成的调节剂。在山羊的研究中发现TIMP1基因可以增加输卵管上皮细胞的增殖，表明TIMP1基因在促进输卵管上皮细胞的存活中可发挥重要作用[4]。有研究表明，TIMP1主要在卵泡中表达，能够促进细胞增殖、凋亡和激素合成。因此，初步推测在绵羊生产中TIMP1基因可能会对其繁殖性状存在一定的影响，并且目前TIMP1基因调控卵泡发育的分子机制尚不明确。鉴于此，本研究以绵羊卵巢为研究对象，通过分析TIMP1基因不同发育时期卵巢中的表达差异及构建表达载体，为进一步深入研究其生物学功能及在卵泡发育中的作用机制奠定试验基础。

1 材料与方法

1.1 材料和菌株

绵羊卵巢组织、pEGFP-C1载体、DH5α感受态细胞、HEK293F细胞株由郑州师范学院分子生物学实验室提供。……