赵英哲，赵 倩，孙宇强，高一鸣，孙丽荣，田万年

吉林农业科技学院动物科技学院，吉林吉林市 132101

1 发病情况

养殖户张某养羊200 只，2019 年4 月初在吉林省珲春市购买60 只绵羊，4 月中旬开始进行放牧，5 月初外地购买绵羊陆续发病。病羊表现为精神不振，反刍减少，可视黏膜发黄，羊后肢大腿内侧有大量黄豆粒大小的血蜱。经抗生素治疗后未见好转，有2 只羔羊死亡。

2 临床症状

羊群被毛无光泽，消瘦，鼻镜干燥，食欲减退，个别羊只出现腹泻，尿液发黄，喜欢躺卧，起立困难。羊群腹部被毛较少处和后腿内侧发现大量黄豆粒大小蜱，静脉采血发现血液稀薄，严重贫血，最后有2 只羊羔衰竭死亡。

3 剖检变化

经检查体表发现大量血蜱，2 只病死羔羊身上发现大量黄豆粒大小的血蜱。病羊消瘦，皮下有大量黄色胶冻样浸润。淋巴结肿大，心脏内膜有出血点，肝脏和脾脏肿大，外膜有出血点。

4 诊断

4.1 涂片检查，采集10 只病羊颈静脉血液5 mL，制作血涂片，用姬姆萨染色，经显微镜镜检显示，红细胞内有圆形、犁籽形虫体，染虫率较低，初步诊断为羊泰勒虫。

4.2 PCR 检测采集2 只病死羔羊和1 只病羊颈静脉血液，按照血液基因组提取试剂盒提取羊血液中的总基因组DNA。根据GenBank 发表的18s rRNA 基因序列（AY262121），利用Primer Premier 5.0软件设计了一对羊泰勒虫特异性引物，引物序列：上游引物P1: 5 ＇ -ATC AGA TAC CGT CGT AGT CC-3＇，下游引物P2:5＇-CTA AGG GCA TCA CAG ACC-3＇,由引物由宝生物工程（大连）有限公司合成。

PCR 反应体系为25 μL：Taq PreMix 12.5 μL，上下游引物各0.5 μL；DNA 2 μL；dd H2O 9.5 μL；PCR 反应条件：95 ℃预变性3 min，94 ℃变性45 s，55 ～62 ℃退火30 s，72 ℃延伸1 min，35 个循环，最后72 ℃延伸5 min。阳性PCR 扩增产物送至上海生工生物技术有限公司进行核苷酸序列测定。……