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右旋糖酐酶生产菌株的分离鉴定及发酵培养基优化*

2021-04-14黄斌良吴华德江朝明

广西科学 2021年1期
关键词:实验

杨 齐,黄斌良,吴华德,江朝明

(广西多得乐生物科技有限公司,广西南宁 530000)

0 引言

右旋糖酐是一种大分子聚合物,主要由D-葡萄糖分子通过α-1,6-糖苷键连接形成的主链,以及α-1,2-糖苷键和α-1,4-糖苷键形成的侧链构成[1]。因其安全无毒、生物相容性好、来源丰富等特性,右旋糖酐已被广泛应用在食品、医药等多个领域[2,3]。天然的右旋糖酐分子量相对较高,必须经酸水解或酶水解形成小分子量右旋糖酐后才能加以应用。但是酸法生产的右旋糖酐含有氯离子,并且所得产物分子量不统一,不能满足临床需求,而酶法反应条件温和,所得产物分子量范围比较狭窄,并且能大大减少污染[4]。

右旋糖酐酶(E.C.3.2.1.11)是一种诱导酶,能够专一性水解右旋糖酐中的α-1,6-糖苷键[5,6]。生产右旋糖酐酶的微生物有很多,从一开始,真菌和细菌就被确定为能够水解葡聚糖的主要酶源,特别是真菌。来源于细菌的右旋糖酐酶相对较少,并且其酶活力相对较低,但是却具有良好的热稳定性[7,8]。真菌来源的右旋糖酐酶大多稳定性好,酶活力较高,具有很高的研究价值和商业价值[9-13]。

Plackett-Burman (PB)实验设计可以从大量变量中筛选主要因素,响应面法是一种有效的实验工具,通过它可以确定多变量系统中的最优条件。因此,为了有利于工业化生产,本研究拟筛选能够高产右旋糖酐酶的真菌菌株,并利用响应面法对其发酵生产右旋糖酐酶的培养基进行优化,以期得到最优的发酵培养基,为其深入研究及工业化应用奠定基础。……

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