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禽白血病病毒衣壳蛋白p15基因慢病毒表达载体的构建及其在鸡肝癌细胞系中的表达

2021-04-13沈逵何倩秦爱建钱琨

畜牧与兽医 2021年4期
关键词:检测

沈逵,何倩,秦爱建,3,钱琨,3*

(1.扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室,江苏 扬州 225009;2.扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室,江苏 扬州 225009;3.江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏 扬州 225009)

禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV)是一种能够引起宿主产生严重免疫抑制的反转录病毒,最终导致宿主产生多种恶性肿瘤[1]。严重的免疫抑制常常造成多种病原的混合感染,有研究表明,先天感染ALV是导致鸡马立克病疫苗免疫效果低下的主要原因之一[2],其与禽网状内皮组织增生症病毒共感染条件下可以促进彼此的复制[3-4],因此ALV对养禽业危害严重。

ALV的基因组具有典型的慢转化型反转录序列:5′-R-U5-gag-pol-env-U3-R-3′[5],主要编码各种结构蛋白(gag、pol、env),包括磷蛋白(如p19)、核衣壳蛋白(如p15、p27)、DNA聚合/整合酶蛋白(如p68、p32)、囊膜蛋白(如gp85、gp37)等。gag基因十分保守,主要编码12 kDa、15 kDa、19 kDa和27 kDa 4种蛋白质,它们分别命名为p12、p15、p19和p27,其中p15和p27为衣壳蛋白[6]。目前对病毒编码蛋白的研究主要集中在p27、gp85和gp37蛋白,已报道的研究发现,gp37在胞浆区域的C末端酪氨酸基序在体内外均可影响ALV-J的致病性[7],gp85含有病毒受体决定簇,其高变区和可变区决定了ALV的中和活性和特异性[8],p27存在多种抗原表位,基因组十分保守,是群特异性抗原,常被作为各亚群ALV的检测指标[9]。衣壳蛋白p15作为一种由124个氨基酸组成的蛋白酶,可对gag和pol基因编码的多聚蛋白进行切割,使其加工成为成熟的非糖基化蛋白和一些多肽。有研究表明,gag末端携带活化状态下的p15时,前体蛋白的成熟和释放过程将十分迅速,并且p15-蛋白N端的7个氨基酸组成的区域有增加病毒装配效率的作用[10]。……

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