方 超，张智明，李建华，何世岷

（哈药集团生物疫苗有限公司，哈尔滨 150069）

猪流行性感冒简称猪流感（Swine influenza，SI），是由A 型流感病毒引起的一种猪的急性呼吸道传染病，主要临床症状为咳嗽、打喷嚏、发热、趴卧、食欲减退等[1-4]。猪流感的发病率极高，且传染性强，很难切断传播途径，一旦感染在短时间内可波及全群，对猪的生长性能造成不良的影响。单纯感染猪流感时死亡率并不高，但若与其他病原混合感染会使死亡率骤增，给养猪业造成严重的经济损失[5-8]。猪流感病毒的流行存在地域性，易发生变异，且具有数十种亚型。猪流感的流行特点导致免疫接种是目前防控该病的唯一有效手段，因此从发病现地分离病毒并制备疫苗对该病的防控尤为重要[9-10]。

1 材 料

疑似猪流感发病猪的鼻拭子样品8份，某猪场现地采集；HI 效价为1∶640 的猪流感病毒H1 亚型特异性阳性血清，HI 效价为1∶640 的猪流感病毒H3 亚型特异性阳性血清，HI 效价为1∶320 的猪流感病毒H5 亚型特异性阳性血清，HI 效价为1∶320的猪流感病毒H9 亚型特异性阳性血清，猪流感病毒H1N1亚型HA和NA基因阳性质粒，猪流感病毒H3N2 亚型HA 和NA基因阳性质粒，均由哈尔滨兽医研究所惠赠；病毒基因组DNA/RNA 快速提取试剂盒，购自北京博迈德生物技术有限公司；DL-2000 DNA Marker，宝生物工程（大连）有限公司产品；猪流感H1、H3、N1 和N2 的分型鉴定引物，由生工生物工程（上海）股份有限公司合成；1%鸡红细胞悬液，由哈药集团生物疫苗有限公司质量管理部参照现行《中国兽药典》制备保存；PBS 溶液，由哈药集团生物疫苗有限公司研发中心配制保存；……