韦 伟, 轩 妍, 黄晓燕

（1. 海南省妇女儿童医学中心新生儿科，海南 海口 570000；2. 海南省妇女儿童医学中心儿科，海南 海口 570000）

支气管肺发育不良 （bronchopulmonary dysplasia，BPD）常见于长期氧疗和机械通气的早产儿，严重影响患儿预后及长期生存质量［1］。研究［2］表明：在胎龄＜32 周早产儿中，BPD 发生率为12%～32%，胎龄越小，BPD 发生率越高。而高氧可通过多种途径引起肺损伤，导致肺泡及微血管发育不良，促进BPD 发生。西地那非是一种选择性的磷酸二酯酶5 （phosphodiesterase 5，PDE-5）抑制剂，能通过增加肺血管中环磷酸鸟苷（cyclicguanosine monophosphate， cGMP） 的浓度使内源性的一氧化氮（nitric oxide，NO）增多，从而起到扩张血管的作用［3］。有研究［4］显示：西地那非能促进肺泡生长和改善大鼠BPD 相关性肺动脉高压，还有研究［5］表明：西地那非能通过增强新生血管介导血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor， VEGF）和血管生成素1（angiopoietin-1，Ang-1） 改善BPD 症状。目前有关西地那非对BPD 作用的研究主要集中在肺动脉高压方面，而对肺组织中缺氧诱导因子1α/2α（hypoxia-inducible factor-1α/2α，HIF-1α/2α） -VEGF通路影响的研究尚未见报道。因此本研究制备大鼠BPD 模型，并给予西地那非治疗，观察西地那非是否对BPD 动物模型的肺发育有改善效果以及对HIF-1α/2α -VEGF 通路相关蛋白表达的影响，探讨西地那非对BPD 的作用方式和作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物、主要试剂和仪器出生12 h 内的Sprague-Dawley （SD）大鼠60 只，雌雄不限，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，实验动物生产许可证号：SCXK （湘） 2015-0016。西地那非（批号：Y002476，辉瑞制药有限公司） ，免疫组织化学SABC、DAB 辣根过氧化物酶显色试剂盒、RIPA 裂解缓冲液和蛋白酶抑制剂试剂（北京中杉生物公司），兔抗鼠HIF-1/2α、VEGF 和CD31 多克隆抗体（美国Santa Cruz 公司），BCA 蛋白定量试剂盒（上海碧云天生物技术有限公司）。……