黄 果, 王佑权, 陈 娟

（1. 南华大学附属第二医院乳腺甲状腺外科，湖南 衡阳 421001；2. 南华大学附属第二医院放疗科，湖南 衡阳 421001）

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，也是导致女性恶性肿瘤死亡的主要原因［1］。随着现代乳腺检查和新辅助化疗的发展，乳腺癌患者的预后得到了较大改善。然而，乳腺癌患者常出现化疗耐药［2］，这是造成乳腺癌化疗失败的主要原因之一。因此，详细而全面地了解乳腺癌化疗耐药的分子机制是提高临床化疗效果的前提。微小RNAs（microRNAs，miRNAs） 是一类短的非编码RNA 分子，通过靶向mRNA 负向调控靶基因表达。研究［3-4］表明：某些miRNAs，如miR-134miR-19a-3p 等，参与乳腺癌的化疗耐药调控，提示miRNAs 可作为乳腺癌耐药治疗的潜在靶点。有研究［5-7］显示：miR-138-5p 可抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移，而在肿瘤耐药方面miR-138-5p 能增强肺癌细胞对吉非替尼药物敏感性，缺氧诱导因子1α （hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）的表达水平与肿瘤的进展密切相关。研究［8］发现：HIF-1α 抑制剂PX-478 能有效增强结直肠癌对奥沙利铂的敏感性。miR-138-5p 和HIF-1α 对肿瘤耐药的作用均已被证实，但miR-138-5p 是否通过HIF-1α 影响肿瘤耐药尚未见相关研究报道。因此，本研究观察miR-138-5p 过表达对人乳腺癌MCF-7 细胞顺铂（cisplatin，DDP） 耐药的影响，并进一步探讨miR-138-5p 是否是通过靶向调控HIF-1α 表达参与人乳腺癌化疗耐药。

1 材料与方法

1.1 细胞、主要试剂和仪器人乳腺癌MCF-7 细胞和293T 细胞购自美国ATCC 公司。 DDP 购自美国Sigma 公司，胎牛血清（fetal bovine serum，FBS） 和RPMI-1640 培养基购自美国Gibco 公司，转染试剂Lipofectamine 3000 购自美国Invitrogen 公司，BCA 蛋白质定量检测试剂盒和蛋白裂解液均购自生工生物工程（上海）股份有……