肌肽对脂多糖诱导星形胶质细胞炎症因子释放的抑制作用及其机制
2021-04-13杨文强杨新生
白 雪, 于 露, 杨文强, 何 鑫, 杨新生, 杨 菁
(1. 锦州医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,辽宁 锦州 121001;2. 锦州卫生学校外科教研室,辽宁 锦州 121001)
肌肽是一种内源性的水溶性二肽,由组氨酸和丙氨酸组成,存在于人体肌肉和脑组织中,具有神经保护作用[1]。研究[2-4]表明:肌肽对糖尿病及缺血再灌注引起的认知功能障碍均具有保护作用,其机制可能与肌肽抑制氧化应激反应,并减少核转录因 子κB (nuclear transcription factor-κB,NF-κB)向核内转移、下调肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白 细 胞 介 素1β (interleukin-1β,IL-1β)的表达进而抑制炎症有关。星形胶质细胞(astrocyte, AS) 是中枢神经系统中数量最多、体积最大和分布最广的一种神经细胞[5]。炎症与AS 的激活密切相关,活化的AS 可释放IL-1β 和TNF-α 等炎症因子引起神经炎症[6-7]。因此,抑制AS 过度激活及其炎症过程是消除神经炎症作用的关键,而肌肽对AS 激活的影响未见报道。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是革兰阴性细菌细胞壁的主要组成成分,是一种作用强的致炎因子[8],可以诱导AS 活化释放TNF-α 和IL-1β 等细胞因子引起炎性反应。本实验以体外培养的大鼠大脑皮质AS 为研究对象,建立LPS 诱导AS 损伤模型,在细胞水平上探讨肌肽对LPS 诱导AS 炎症损伤的影响及其作用机制,为肌肽的应用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物、主要试剂和仪器新生SD 大鼠由锦州医科大学实验动物中心提供,动物生产许可证号: SCXK (辽) 2017-0004。DMEM-F12 培养液(美国Hyclone 公司),肌肽(纯度>99.0%,批号:1901036,由苏州富士莱医药股份公司惠赠),神经胶质酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)(GA-5)(盛克鲁斯生物技术有限公司),LPS、10×多聚赖氨……