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枳椇果序轴水提取液对NASH的预防和治疗研究

2021-04-11周敏吴琪珍

当代化工研究 2021年15期
关键词:枳椇过氧化脂质

*周敏 吴琪珍

(赣南卫生健康职业学院 江西 341000)

引言

枳椇又名鸡爪子、拐枣、万子果、南枳椇,是鼠李科枳椇属的高大落叶乔木。分布于安徽、江苏、浙江、江西、福建、广东、广西、湖南、湖北等地。野生枳椇在江西广泛分布于峰山、九连山、五指峰,吉安等赣南地区。

枳椇含有大量的葡萄糖和苹果酸钙,具有较强的利尿作用,能促进乙醇的分解,显著降低血液中的乙醇浓度,并能清除体内由乙醇产生的自由基,防止过氧化氢酶的形成,从而减少酒精对肝组织的损害,避免因酒精中毒而导致的各种代谢异常。

中药枳椇性平、入脾、胃经,具有止渴功能,一直被世代医家用于止渴解酒,适用于过度饮酒、醉不醒、口干烦渴等。《本草纲目》称之为“甘平无毒,治头风,小腹拘急”。《唐本草》记载其“止渴除烦,润五脏,利大小便,去膈上热,功用如蜜”。《滇南本草》称其“治一切左瘫右痪,风湿麻木,能解酒毒”。《本草拾遗》记载“木蜜树生南方,人呼白石木,枝、叶俱甜。嫩叶可生啖,味如蜜。老枝细破,煎汁成蜜,倍甜,止渴解烦也”。《滇南本草图说》记载“补中益气。痰火闭结于胸中,用此可解”。煮粥服食之,对饮酒过量、口干烦渴者尤其适宜。

关于枳椇的药用部位,古今文献有不同的记载,如《广东中药》指出枳椇药用部位为果实,《中药材手册》规定药用部位为“果实及肉质膨大的花序轴”,《陕西中草药》提出枳椇药用“果梗或种子”等。目前对枳椇抗乙醇作用的研究主要集中在种子部位,研究表明枳椇子乙酸乙酯提取物具有明显的抗乙醇作用,但对其他部位抗乙醇作用机理的研究较少。

脂质过氧化损伤导致的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的发病机制尚未完全弄清。但是研究表明脂质过氧化是纳什均衡中最重要的因素。本研究旨在建立高脂饮食致NASH模型,检测肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,探讨脂质过氧化损伤对NASH的影响,研究枳椇不同部位水提物对肝组织中SOD含量的影响。

1.实验分析材料

(1)实验分析动物

60只雄性SD大鼠,清洁级,重200-250g,由浙江省实验分析动物中心提供,许可证号为SYXK(浙江)2005-0074,存放于浙江省医学科学院实验分析动物中心。

(2)主要试剂

超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒(ADL),购自上海浙北生物科技有限公司。

(3)药物制备

制备枳椇不同部位的水提取物:取自江西产枳椇不同部位压平,放入小萃取器中,加水,萃取两次,合并滤液,得到枳椇不同部位的水提取物0.2g/ml;制备聚烯磷脂酰胆碱和硫普罗宁的混合物:硫普罗宁片(凯西莱,批号:061207)和多烯磷脂酰胆碱片(易善复,批号:d8096,赛诺菲(北京)制药有限公司。)制成粉末,加入蒸馏水,制备出含钙石6mg和易善复13.68mg的混合溶液。

2.实验分析方法

(1)造模

用高脂饲料(100g/kg猪油+胆固醇)喂养正常大鼠12周,建立实验分析NASH模型。

(2)给药及分组

将四十只SD大鼠随机分为正常组、模型组、对照组、枳椇不同部位组。模型组每天给予10ml/kg蒸馏水,喂养2次;正常组每天给予标准饲料和10ml/kg蒸馏水,喂养2次;枳椇不同部位每天给予10ml/kg水提取物,然后服用2次。对照组给予多烯磷脂酰胆碱和硫普罗宁的混合物,每天10ml/kg,连续12周。

(3)观察指标

处死大鼠,取肝组织上清液和生理盐水(1:9)匀浆。化学比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量。采用He染色法对肝组织进行染色,根据脂肪肝和酒精性肝病(脂肪变性)诊断标准观察肝组织病理变化。

(4)统计学处理

资料用(±s)表示,用spss13.0软件包处理,用单因素方差分析。

3.实验分析结果

(1)肝组织脂肪变性、炎症程度积分

模型组肝组织脂肪变性及炎症程度积分较正常组明显增高,差异有显著性意义(p&;1t;0.01),提示造模成功。不同部位枳椇果序轴组、对照组肝组织脂肪变性及炎症程度积分较模型组明显减轻,差异有显著性意义(p&;1t;0.01)。不同部位枳椇果序组脂肪变性及炎症程度与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。

(2)肝组织MDA、SOD、GSH-Px含量

模型组肝组织MDA较正常组明显增高,SOD、GSH-Px较正常组明显减低,差异有显著性意义(p&;1t;0.01);不同部位枳椇果序轴组、对照组肝组织MDA较模型组明显减低,SOD、GSH-Px较模型组明显增高,差异有显著性意义(p&;1t;0.01)。不同部位枳椇果序轴组MDA、SOD、GSH-Px与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。

4.讨论

目前对NASH的治疗主要采用降脂药、抗氧化剂、保肝药和胰岛素增敏剂等方法。由于病机复杂,诊断特异性差,疗效不佳。

枳椇可以用作食物和药物。“香甜,本草甘露,无毒”。解渴、清热、滋润五脏、缓解便秘。也可以用来滋养和保护肝脏。结果表明,枳椇不同部位对脂肪肝有较好的防治效果。近年来,笔者采用不同部位的枳椇治疗非酒精性脂肪性肝炎,取得了良好的疗效。结果表明,脂质过氧化在非酒精性脂肪性肝炎的发生发展中起重要作用,枳椇果序轴水提物对非酒精性脂肪性肝炎有良好的预防作用,其机制可能与阻断脂质过氧化链反应、降低丙二醛生成、提高肝组织SOD水平和GSH-Px活性有关。

此外,在肝脏保护方面,也有不少学者进行了深入的研究。刘秀玲等研究了枳椇子提取物对基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。赵燕平等研究了枳椇子对高脂饮食诱导脂肪变性大鼠肝损伤的防治作用。宋娟观察枳椇子对肝纤维化大鼠血脂脂质过氧化的动态影响。HASEK研究了长期乙醇喂养大鼠脂多糖(LPS)诱发的肝损伤。

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