薛 丽，刘晓霞，罗 莹，吕中睿，张建国,2,3，饶国栋,2,3＊

(1. 林木遗传育种国家重点实验室，中国林业科学研究院林业研究所，北京 100091；2. 南京林业大学，南方现代林业协同创新中心，江苏 南京 210000；3. 国家林业和草原局林木培育重点实验室，中国林业科学研究院林业研究所，北京 100091)

微管是由α、β-微管蛋白以异二聚体的形式组装而成的中空管状结构[1]。植物细胞中，微管可以快速的聚合或者解聚、迅速转变微管列阵，对细胞的正常扩张和分化具有重要作用。微管结合蛋白(MAP)是一类对微管的组装和功能具有调控作用的蛋白[2]。Changjie 等最早从烟草(Nicotiana tabacumL.) BY-2 (‘Bright Yellow-2’)悬浮培养细胞中分离得到一类与微管紧密结合且分子量约为65 kD 的蛋白，即MAP65[3]。MAP65 蛋白通常定位于一种或几种微管列阵上，是一类可与微管交联并促进微管成束的微管结合蛋白[4]。

从烟草BY-2 悬浮培养细胞中分离出小原生质体，制备胞质提取物，之后加入紫杉醇协助组装微管，再将微管和MAP 低温高速离心以去组装，经过数次组装-去组装循环，分离得到3 个烟草MAP65蛋白[5]。后用同样的方法在胡萝卜(Daucus carotaL.)悬浮细胞中分离得到3 个胡萝卜MAP65 蛋白[6]。随着拟南芥(Arabidopsis thaliana(L.) Heynh.)与水稻(Oryza sativaL.)基因组测序的完成，拟南芥和水稻中分别鉴定出了9 和11 个MAP65 蛋白家族成员[7-8]。小立碗藓 (Physcomitrella patens(Hedw.)Bruch & Schimp.)中克隆得到了5 个MAP65基因[9]。对拟南芥MAP65 蛋白家族的研究表明，9 个成员之间氨基酸相似性为28%～79%，C 端序列同源性尤其低，C 端包含与微管特定结合的结构域，决定了微管聚合的速率，不同基因的C 端微管结合结构域不同，故以不同的效率促进微管聚合[10]。……