任 程，杨利林

(1.青海省草原总站，青海 西宁 810008；2.海西州草原工作站，青海 德令哈 810799)

3000毒价/ C型肉毒素饵料，在2019年6月夏季经青海省青南牧区玛沁县进行的田间小区试验表明，具有使用简便，无需现场加工配制；害鼠适口性好，可在四季使用的特点，突破了生物毒素制剂仅在寒冷的冬春季使用的局限，极大地改善了防控人员的工作环境，同时解决了因防控禁牧需家畜转场的难题，且防治效果符合《青海省鼠虫灾害防治实施办法》验收标准的要求。为进一步验证3000毒价/C型肉毒素饵料在本省柴达木地区的适应性以及常温保存抗氧化失毒期限和最佳使用剂量等，试验组于2019年7月29日至2019年8月10日，对青海省生物药品厂有限公司研发的C型肉毒素饵料Ⅰ和C型肉毒素饵料Ⅱ，在海西州德令哈市进行了防控高原鼠兔的田间小区药效试验，现将试验结果总结如下。

1 试验区自然概况

试验区位于海西州德令哈市蓄集乡陶斯图村的春秋草场，海拔高度3 600～3 700 m，地形平缓。气温年变化和日变化剧烈，四季变化交替不分明，仅有冷暖季之分，冷季长，暖季短，年积温量小，为高山荒漠气候区。昼夜温差大，年最高气温33.4 ℃，最底气温-29 ℃，年平均气温3.4 ℃，气候干旱少雨，风沙大，相对无霜期100 d，全年平均降水量238.9 mm。草地类型为高寒草原类。牧草优势种有：紫花针茅(StipapurpureaGriseb.)、嵩草(Kobresiamyosuroides(Villars)Foiri)、苔草(CarexSPP.)、冰草(Agropyroncristum(L.)Gaertn.)及二裂委陵菜(Potentillabifurca)等为主的可食牧草，伴生种有：早熟禾(PoaannuaL.)、羊茅(FestucaovinaL.)、火绒草(Leontopodiumleontopodioides(Willd.)Beaur.)及垂穗披碱草(ElymusnutansGriseb.)等，不食及毒害草有：多种马先蒿(PedicularisL.)、棘豆(OxytropisDC)、龙胆(GentianascabraBunge)、狼毒(StellerachamaejasmLinn.)、多枝黄芪(AstragalusPolycladusBur.etFranch.)、大戟(EuphorbiapekinensisRupr.)等。

2 材料与内容

2.1 试验材料

害鼠种类：高原鼠兔(ochotonacurzoniae)。

试验材料：C型肉毒素饵料Ⅰ(青海省生物药品厂有限公司生产)；C型肉毒素饵料Ⅱ(青海省生物药品厂有限公司生产)。

2.2 试验内容

2.2.1 C型肉毒素饵料使用剂量试验

2.2.2 C型肉毒素饵料不同引诱剂试验

2.2.3 C型肉毒素饵料氧化失毒试验

3 试验方法

3.1 C型肉毒素饵料使用剂量试验

在海西州德令哈市蓄集乡选择高原鼠兔危害中、重度，面积约为12 hm2的草场作为试验区，利用C型肉毒素饵料Ⅰ，施饵量为3 g/洞、2 g/洞、1 g/洞进行小区试验，同时设CK处理，共计四个处理，每一处理重复3次，小区面积1 hm2，随机区组排列。样方面积1/15 hm2，对角线取样，取样数量3个。采用堵洞开洞法调查有效洞口数，施饵前先将样方内所有洞口堵住，经24 h检查防前有效洞口数，施饵后第七天采用施饵前相同的方法进行残留有效洞口数的检查，计算出洞口减退率和校正洞口减退率，并运用数理统计的方法分析比较不同防控剂量对高原鼠兔防控效果。

计算公式：

3.2 C型肉毒素饵料不同引诱剂试验

在海西州德令哈市蓄集乡选择高原鼠兔危害中、重度，面积约为9 hm2的草场作为小区试验，小区设置为：A：C型肉毒素饵料Ⅰ，施饵量3 g/洞；B：C型肉毒素饵料Ⅱ，施饵量3 g/洞；同时设CK处理，共计三个处理，每一处理重复3次，小区面积1 hm2，随机区组排列。防控前、后采用与试验3.1相同的调查方法，调查有效洞口数计算出有效洞口减退率，并用生物统计的方法予以分析比较不同引诱剂的防控效果。

3.3 C型肉毒素饵料氧化失毒试验

选择中、低密度高原鼠兔危害草地9 hm2，将C型肉毒素饵料Ⅰ置于20 ℃～31 ℃常温库房中，在自然状态下保存40 d后进行防控药效小区试验，小区设置为：F：40 dC型肉毒素饵料Ⅰ；G：C型肉毒素饵料Ⅰ，投饵量均为3 g/洞。同时CK处理，共三个处理，每一处理小区面积为1 hm2，重复3次，随机区组排列。采用与试验3.1相同的调查方法进行取样调查，分析比较C型肉毒素饵料Ⅰ经40 d氧化时间对高原鼠兔的防控效果。

4 结果与分析

4.1 C型肉毒素饵料使用剂量试验

试验区主要害鼠种类为高原鼠兔，防前经54个样方的调查，平均有效洞口数为44.42个/667 m2，最高达144个/667 m2。通过对C型肉毒素饵料Ⅰ不同使用剂量防控小区药效试验，其结果见表1。

表1 C型肉毒素饵料使用剂量药效试验结果(1/15 hm2)

续表：

将表1数据进行方差分析其结果见表2。

表2 方差分析

从表2可以看出F=0.0250.05，差异不显著。表明施饵量3 g/洞、2 g/洞、1 g/洞在0.05水平上校正防控效果间无显著差异，对高原鼠兔具有相同的防控效果。

4.2 C型肉毒素饵料不同引诱剂试验

通过对添加不同引诱剂的C型肉毒素饵料Ⅰ和C型肉毒素饵料Ⅱ，以相同施饵量3 g/洞进行防控高原鼠兔药效对比试验，其结果见表3。

表3 C型肉毒素饵料不同引诱剂药效试验结果(1/15 hm2)

从表3可以看出，采用C型肉毒素饵料Ⅰ(A)进行防控，平均校正防控效果为90.09%，C型肉毒素饵料Ⅱ(B)进行防控，平均校正防控效果为90.22%。比较两种不同引诱剂的C型肉毒素饵料防控效果，C型肉毒素饵料Ⅱ较C型肉毒素饵料Ⅰ，增加0.13%。将表3数据进一步做t检验，结果见表4。

表4 t-检验： 双样本等方差假设

从表4可以看出│T│=0.027

4.3 C型肉毒素饵料氧化失毒试验

经在海西州德令哈市蓄集乡春秋草场对常温库房中保存期40d的C型肉毒素饵料Ⅰ进行防控高原鼠兔的药效小区试验，其结果见表5。

从表5可以得出，常温保存40d的C型肉毒素饵料Ⅰ毒饵对高原鼠兔的平均防控效果为73.02%，平均校正防控效果为81.49%；正常低温保存的C型肉毒素饵料Ⅰ毒饵对高原鼠兔的平均防控效果为85.55%，平均校正防控效果为90.09%，将表5数据进行t检验，其结果见表6。

表5 C型肉毒素饵料氧化失毒药效试验结果(1/15 hm2)

表6 t-检验： 双样本等方差假设

从表6可以看出│T│=2.134>t0.05=2.119，即差异性显著，说明C型肉毒素饵料Ⅰ在常温库房保存40d与正常低温保存条件下，在0.05水平上校正防控效果间存在显著差异，即两种不同保存条件下对高原鼠兔具有不同的防控效果，正常低温保存的C型肉毒素饵料Ⅰ防治效果要高于常温库房保存40d的防控效果。

5 结论与讨论

5.1 毒饵施饵剂量效果

经田间试验证明，C型肉毒素饵料施饵量为3 g/洞、2 g/洞、1 g/洞进行小区试验，平均校正防控效果为88.35%、90.12%和89.19%。三种剂量间经方差分析，差异不显著(F=0.0250.05)，对高原鼠兔具有相同的防控效果。从防控成本考虑，试验组认为以1 g/洞的施饵量为宜，可在大面积防控中推广使用。

5.2 不同引诱剂效果

添加不同引诱剂的C型肉毒素饵料Ⅰ和C型肉毒素饵料Ⅱ，在相同施饵量(3 g/洞)的条件下，平均校正防控效果为90.09%和90.22%，经t检验，差异不显著(│T│=0.027

5.3 毒饵失毒试验

3000毒价/克C型肉毒素饵料，使用时无需现场加工配制。因采用新型诱鼠技术，夏季使用时具有适口性好，防治效果达到《青海省鼠虫灾害防治实施办法》验收标准，可在四季使用等优点，突破生物毒素制剂仅在寒冷的冬春季使用局限，对改善工作环境，实现安全、有效控制鼠害，修复草原生态，开辟了新途径。

5.4 建议

(1)试验投饵时，饵料包装袋内有少量的饵粒粉末，颗粒紧实度欠缺，造成防控成本的增加。因此，建议改进饵粒加工工艺，增加颗粒紧实度，降低破损率，以避免不必要的浪费。

(2)试验时使用的C型肉毒素饵料，由于颗粒长短不一，导致单粒饵料重量不同，投饵时很难掌握投饵量。建议生产厂家研发提供相应的投饵器具，以提高投饵量的精准度，减少和避免投饵量过大造成的浪费和投饵量过小而达不到防控要求。

(3)由于C型肉毒素饵料Ⅰ在常温库房保存40 d，投饵时已发霉变质，造成适口性降低，高原鼠兔不愿采食而影响防控效果，对此将有待于进一步试验验证。同时，青海省草原鼠害防控历期通常为20～30 d，试验组建议在常温库房保存15～30 d条件下进行氧化失毒试验。