于旭华，丁美祝，谢丹，胡佩欣，梁紫尧，范龙，林琳，许银姬

(广州中医药大学 第二附属医院 呼吸与危重症科，广东 广州 512120)

慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)是一种危害健康的全球性疾病.临床上主要表现为慢性咳嗽，呼吸困难或气短、胸闷、喘息、消瘦及疲乏等症状.病理上则表现为持续的小气道慢性炎症，过度的氧化应激和金属蛋白酶表达升高，肺上皮细胞在长期炎症的刺激下逐渐衰老损伤，并形成气道狭窄[1].目前，COPD发生的病理机制并不完全清楚.吸烟和反复的气道感染是COPD形成的主要因素.COPD动物模型的制备主要以香烟暴露或联合气道刺激物的滴注为主要手段，然而，尽管COPD以慢性气道炎症为主要表现，但在大多数动物模型中仍表现为炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达升高的急性肺部炎症[2].

为了进一步揭示COPD慢性或亚急性气道炎症发生的病理表现和特点，本研究利用较长时间香烟暴露(7周)，联合脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)气道反复滴注以及体外实验，观察和比较香烟、LPS以及二者联合刺激对小鼠气道免疫细胞、氧化应激、炎症因子表达以及气道上皮衰老损伤的作用.从而反映和揭示吸烟联合反复气道感染对气道免疫、炎症及组织衰老的影响.

1 材料和方法

1.1 主要材料和仪器

脂多糖(批号：113M4068V)与2-丁酸佛波醇酯(PDB，批号：P1269-10MG)均购自Sigma公司.NucleoZOL(Macherey-Nagel,lot：1609/001)，异丙醇购自广州化学试剂有限公司.SYBR Premix Ex TapTMⅡ(No.RR820)试剂盒与Prime-ScriptTMRT Master Mix(No.RR036A-1)试剂盒购自TaKaRa公司.Senescence β-Galactosidase Staining Kit (#9860)购自CST公司.大前门牌过滤嘴香烟(烟碱含量0.8 mg，焦油量11 mg /支)购自上海烟草集团有……