消肿止痛合剂对大鼠缺血皮瓣血管再生及VEGF-Dll4/Notch信号通路的影响
2021-04-07姚兴璋刘涛何志军李兴勇宋渊李岩李金鹏陈文王海刚何元旭
姚兴璋, 刘涛, 何志军*, 李兴勇, 宋渊, 李岩, 李金鹏, 陈文, 王海刚, 何元旭
(1.甘肃省中医院 骨科, 甘肃 兰州 730050; 2.甘肃省人民医院 骨科, 甘肃 兰州 730000;3.甘肃中医药大学 中医临床学院, 甘肃 兰州 730020)
随机型皮瓣常被用来覆盖整形和创伤手术中的浅表皮肤缺损,尽快促进血管新生是皮瓣成活的关键.中医药在这方面取得了一定的研究进展[1].前期临床研究发现消肿止痛合剂可显著降低软组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6), 促进皮瓣成活,降低转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)炎性因子水平,阻止外伤后炎症介质的释放[2].血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)是血管内皮细胞生长和分化的首要因子,在血管生成过程中非常关键[2-3].通常VEGF指的是VEGF-A,其结合受体包括血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)和受体2(VEGFR2).目前针对中医药通过VEGF-Dll4/Notch信号通路调控皮瓣还少见报道.本研究采用大鼠随意皮瓣模型,利用消肿止痛合剂以及VEGF-Dll4/Notch信号通路阻断剂干预,观察皮瓣成活率,将进一步揭示VEGF-Dll4/Notch信号通路在皮瓣血管再生中的作用机制.
1 材料与方法
1.1 实验材料
4月龄240只SD大鼠,雌雄各半,体质量(200~240) g,购自甘肃省中医药大学动物实验中心,合格证号:SYXK(甘)2016-0012.饲养条件: 环境温度为23 ℃~25 ℃,湿度为60%~70%,给予正常饮水和进食,适应性喂养 1周后开始实验.动物实验符合甘肃中医药大学实验动物伦理委员会制定的动物实验标准. VEGF、Notch1、Dll4抗体(购自Abcam公司), VEGFR抑制剂Axitinib、Notch-1抑制剂MK-0752(购自Selleck公司),HRP标记的山羊抗兔(购自中杉金桥生物技术有限公司),Western blot检测试剂盒(索莱宝科技有……