邓征宇

（湖南省永州市冷水滩区畜牧水产事务中心 425000）

志贺氏菌属于革兰阴性菌，在显微镜下呈杆状且观察到没有鞭毛、有菌毛，是常见肠道致病菌，其引起的细菌病是影响公共卫生的人畜共患病之一。志贺菌在到达结肠后，首先会侵入结肠上皮细胞，在细胞内复制，然后扩散到邻近细胞，最终引起强烈的炎症反应[1]。目前为止，通过不同的抗原差异将志贺氏菌分为痢疾志贺氏菌、鲍氏志贺氏菌、福氏志贺氏菌和宋内志贺氏菌，共鉴定出约55 种血清型。在养殖业中，志贺氏菌的感染会迅速传播，如果处理不及时，会造成不可挽回的损失。

本文从感染志贺菌病的肉鸡中分离出31 株志贺氏菌分离株，通过致病性评估筛选出强致病性菌株。以强致病性菌株感染30 日龄肉鸡，建立了动物治疗模型。为后续噬菌体治疗试验建立了基础[2]。

1 材料与方法

1.1 志贺氏菌的分离纯化，致病性评估

细菌分离自感染志贺菌病的肉鸡黏膜中。刮取感染志贺氏菌的肉鸡肠道黏膜物1g，溶于10ml 无菌水中混匀，通过不同梯度稀释后取100μl 在SS （志贺菌与沙门氏菌选择性培养基）培养基进行涂布。挑取单个粉色菌落进行纯化，使用细菌DNA提取试剂盒进行DNA 提取后进行16Sr DNA 鉴定。

为了评估分离菌株的致病性，选取志贺氏菌分离株进行富集培养后以每只肉鸡终浓度约为5×107CFU 的量进行灌喂，此试验每组为5 只肉鸡，观察24h 内肉鸡的变化。

1.2 动物治疗模型建立

筛选出强致病性志贺氏菌分离株后，以1×106CFU，1×107CFU，1×108CFU 的量对30 日龄肉鸡进行灌喂感染。……