周媛媛，刘宁雨，马丹娜，高蕙蕊，于海龙，刘 艳*

(1.黑龙江中医药大学药学院，黑龙江 哈尔滨 150040；2.哈尔滨市食品药品检验检测中心，黑龙江 哈尔滨 150525)

核桃青皮为胡桃科胡桃属植物胡桃楸JuglansmandshuricaMaxim.的未成熟青果皮，别名青胡桃皮、青龙衣，主要分布在我国的东北地区，在内蒙古、河北、山东等地区也有少许分布，资源丰富，为我国民间常用中药，其味苦、涩，性平，具有清热解毒、止痢、疗癣等功效，可用于治疗皮肤瘙痒、发热咳嗽、水痢等[1-2]。目前，从核桃青皮中主要分离得到三萜类、黄酮类、萘醌类等成分。现代药理研究表明核桃青皮具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌等作用[3]。近年来胡桃属的药用价值引起了人们的关注，为了进一步研究其药效物质基础，本实验对其化学成分进行系统研究，共分离得到14个化合物，其中3个黄酮类、7个黄酮苷类、4个萘苷类。

1 材料

Bruker-400型超导核磁共振光谱仪(瑞士Bruker公司)；Finnigan LCQ质谱仪；Heidolph-Laborota 4000型旋转蒸发仪(德国海道夫公司)；柱层析硅胶(青岛海洋化工厂)；柱色谱ODS (日本YMC公司)；其他试剂均为分析纯。

药材于2019年7月采自吉林省长白山地区。经黑龙江中医药大学药学院杨炳友教授鉴定为胡桃科植物核桃楸JulansmandshuricaMaxim未成熟外果皮，标本(20190813)保存于黑龙江中医药大学中药化学教研室。

2 提取与分离

取干燥的核桃青皮粉末10.0 kg，用甲醇浸泡1 d，回流提取3次，减压浓缩得到提取物。以适量蒸馏水添加并分散所得提取物,依次用二氯甲烷、乙酸乙酯及水饱和正丁醇进行多次萃取，萃取液经减压浓缩得各部位浸膏。

取正丁醇浸膏(208 g)，经硅胶柱，以二氯甲烷-甲醇系统梯度洗脱，得到8个组分Fr.1～Fr.8。Fr.1经硅胶柱，以二氯甲烷-甲醇(15∶1～0∶1)梯度洗脱，得化合物12(6.8 mg)、13(5.4 mg)、14(7.2 mg)；Fr.6经硅胶柱以二氯甲烷-甲醇(15∶1～0∶1)梯度洗脱后，得7个组分Fr.6.1～Fr.6.7，Fr.6.4经硅胶柱以二氯甲烷-甲醇(20∶1～0∶1)系统梯度洗脱后，得到化合物2(3.6 mg)、5(6.3 mg)、7(4.7 mg)；Fr.6.6经硅胶柱以二氯甲烷-甲醇(10∶1～0∶1)系统梯度洗脱后，得化合物4(5.8 mg)、6(5.6 mg)、8(7.2 mg)、10(5.7 mg)；Fr.6.7经硅胶柱以二氯甲烷-甲醇(15∶1～0∶1)系统梯度洗脱后，得到化合物1(4.2 mg)、11(4.8 mg)；Fr.8经硅胶柱色谱二氯甲烷-甲醇(10∶1～0∶1)与ODS硅胶柱甲醇-水(40∶60～100∶0)反复梯度洗脱得化合物3(3.3 mg)、9(5.1 mg)。

3 结构鉴定

化合物1：棕褐色粉末，分子式C25H26O12。ESI-MSm/z:541.1[M+Na]+。1H-NMR (400 MHz，acetone-d6)δ:9.26 (1H，s，8-OH)，8.87 (1H，s，4-OH)，8.10 (1H，s，4″-OH)，7.71 (1H，dd，J=8.2，0.8 Hz，H-5)，7.42 (2H，s，H-2″，6″)，7.28 (1H，t，J=8.2 Hz，H-6)，7.21 (1H，d，J=8.2 Hz，H-3)，6.80 (1H，dd，J=8.2，0.8 Hz，H-7)，6.53 (1H，d，J=8.2 Hz，H-2)，5.10 (1H，d，J=7.2 Hz，H-1′)，4.76 (1H，dd，J=10.6，2.8 Hz，H-6′)，4.47 (1H，dd，J=10.6，6.2 Hz，H-6′)，3.95 (1H，m，H-5′)，3.84 (3H，s，3″，5″-OCH3)，3.66 (1H，m，H-3′)，3.64 (1H，m，H-2′)，3.58 (1H，m，H-4′)；13C-NMR (125 MHz，acetone-d6)δ:148.6 (C-1)，107.6 (C-2)，112.6 (C-3)，149.6 (C-4)，113.7 (C-5)，127.2 (C-6)，112.2 (C-7)，154.7 (C-8)，117.3 (C-9)，128.4 (C-10)，104.4 (C-1′)，77.6 (C-2′)，74.6 (C-3′)，71.4 (C-4′)，75.5 (C-5′)，64.6 (C-6′)，121.3 (C-1″)，108.2 (C-2″，C-6″)，148.4 (C-3″，C-5″)，141.5 (C-4″)，166.3 (C-7″)，56.5 (C-3″，5″-OCH3)。以上数据与文献[4]基本一致，故鉴定为1，4，8-三羟基萘-1-O-β-D-[6″-O-(4″-羟基-3″，5″-二甲氧基苯甲酰)]-葡萄糖苷。

化合物2：白色粉末，分子式C18H20O10。ESI-MSm/z:397.1[M+H]+。1H-NMR (400 MHz，CD3OD)δ:7.72 (1H，dd，J=0.8，8.0 Hz，H-5)，7.56 (1H，s，H-2)，7.28 (1H，t，J=8.0 Hz，H-6)，6.86 (1H，dd，J=0.8，8.0 Hz，H-7)，4.86 (1H，d，J=8.0 Hz，H-1′)，3.84 (3H，s，11-COOCH3)；13C-NMR (125 MHz，CD3OD)δ:147.6 (C-1)，109.2 (C-2)，105.8 (C-3)，155.3 (C-4)，116.2 (C-5)，128.6 (C-6)，116.4 (C-7)，157.7 (C-8)，120.3 (C-9)，128.8 (C-10)，172.3 (C-11)，105.6 (C-1′)，80.1 (C-2′)，75.4 (C-3′)，71.8 (C-4′)，78.4 (C-5′)，62.8 (C-6′)，53.1 (C-11-COOCH3)。以上数据与文献[5]基本一致，故鉴定为1，4，8-三羟基-3-萘甲酸-1-O-β-D-葡萄糖苷甲酯。

化合物3：棕色粉末，分子式C21H26O12。ESI-MSm/z:493.1[M+Na]+。1H-NMR (400 MHz，CD3OD)δ:7.64 (1H，dd，J=0.8，7.7 Hz，H-5)，7.26 (1H，t，J=7.7 Hz，H-6)，7.20 (1H，d，J=8.0 Hz，H-3)，6.81 (1H，dd，J=0.8，7.7 Hz，H-7)，6.69 (1H，d，J=8.0 Hz，H-2)，4.97 (1H，d，J=0.8 Hz，H-1″)，4.95 (1H，d，J=7.8 Hz，H-1′);13C-NMR (125 MHz，CD3OD)δ:148.8 (C-1)，108.5 (C-2)，113.3 (C-3)，150.7 (C-4)，114.8 (C-5)，127.3 (C-6)，112.3 (C-7)，154.8 (C-8)，117.9 (C-9)，129.1 (C-10)，105.5 (C-1′)，75.4 (C-2′)，78.3 (C-3′)，71.6 (C-4′)，77.1 (C-5′)，68.1 (C-6′)，110.3 (C-1″)，85.4 (C-2″)，83.1 (C-3″)，78.5 (C-4″)，62.6 (C-5″)。以上数据与文献[6]基本一致，故鉴定为1，4，8-三羟基萘-1-O-β-D-葡糖醛基-(1→6)-α-L-阿拉伯糖苷。

化合物4：白色粉末，分子式C25H28O13。ESI-MSm/z:559.2[M+Na]+。1H-NMR (400 MHz，DMSO-d6)δ:12.02 (1H，s，8-OH)，8.10 (1H，s，4-OH)，7.48 (1H，d，J=8.6 Hz，H-6)，7.36 (2H，s，H-2″，6″)，6.56 (1H，d，J=8.6 Hz，H-7)，4.74 (1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)，4.61 (1H，brd，J=4.2 Hz，H-4)，3.02 (1H，m，H-2)，2.20 (1H，m，H-3)；13C-NMR (125 MHz，DMSO-d6)δ:206.6 (C-1)，33.7 (C-2)，30.9 (C-3)，64.9 (C-4)，149.3 (C-5)，128.9 (C-6)，118.3 (C-7)，158.7 (C-8)，115.6 (C-9)，135.6 (C-10)，105.0 (C-1′)，75.6 (C-2′)，78.0 (C-3′)，71.9 (C-4′)，75.8 (C-5′)，60.9 (C-6′)，121.4 (C-1″)，108.5 (C-2″，6″)，148.8 (C-3″，5″)，142.3 (C-4″)，166.7 (C-7″)，57.1 (3″，5″-OCH3)。以上数据与文献[7]基本一致，故鉴定为4，5，8-三羟基-α-四氢萘酮-5-O-β-D-[6′-O-(4″-羟基-3″，5″-二甲氧基苯甲酰)]葡萄糖苷。

化合物5：无色簇状结晶，分子式C21H20O9，ESI-MSm/z:417.1[M+H]+。1H-NMR (400 MHz，DMSO-d6)δ:9.59 (1H，s，4′-OH)，8.43 (1H，s，H-2)，8.07 (1H，d，J=8.8 Hz，H-5)，7.44 (2H，d，J=6.2 Hz，H-2′，6′)，7.26 (1H，d，J=1.6 Hz，H-8)，7.17 (1H，dd，J=1.6，8.8 Hz，H-6)，6.82 (2H，d，J=6.2 Hz，H-3′，5′)，5.49 (1H，d，J=7.8 Hz，H-1″)；13C-NMR (125 MHz，DMSO-d6)δ:153.2 (C-2)，123.4 (C-3)，174.1 (C-4)，126.3 (C-5)，115.0 (C-6)，160.7 (C-7)，99.4 (C-8)，156.2 (C-9)，117.6 (C-10)，121.6 (C-1′)，129.3 (C-2′，6′)，114.2 (C-3′，5′)，156.5 (C-4′)，102.6 (C-1″)，71.1 (C-2″)，72.4 (C-3″)，69.2 (C-4″)，76.3 (C-5″)，61.7 (C-6″)。以上数据与文献[8]基本一致，故鉴定为4′-羟基异黄酮-7-O-β-D-半乳糖苷。

化合物6：浅黄色粉末，分子式C21H20O10，ESI-MSm/z:433.1[M+H]+。1H-NMR (400 MHz，DMSO-d6)δ:7.72 (2H，d，J=8.6 Hz，H-2′，6′)，6.88 (2H，d，J=8.6 Hz，H-3′，5′)，6.34 (1H，d，J=1.2 Hz，H-8)，6.13 (1H，d，J=1.2 Hz，H-6)，5.29 (1H，d，J=2.0 Hz，H-1″)0.96 (3H，d，J=5.8 Hz，-CH3)；13C-NMR (125 MHz，DMSO-d6)δ:157.3 (C-2)，134.9 (C-3)，177.7 (C-4)，161.5 (C-5)，98.8 (C-6)，164.5 (C-7)，93.8 (C-8)，156.0 (C-9)，103.7 (C-10)，120.1 (C-1′)，130.3 (C-2′，6′)，115.1 (C-3′，5′)，160.4 (C-4′)，101.4 (C-1″)，70.3 (C-2″)，70.1 (C-3″)，71.2 (C-4″)，70.3 (C-5″)，17.8 (C-6″)。以上数据与文献[9]基本一致，故鉴定为山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷。

化合物7：浅黄色粉末，分子式C21H20O12，ESI-MSm/z:487.1[M+Na]+。1H-NMR (400 MHz，DMSO-d6)δ:7.74 (1H，d，J=1.8 Hz，H-2′)，7.59 (1H，dd，J=1.8，8.4 Hz，H-6′)，6.91 (1H，d，J=8.4 Hz，H-5′)，6.74 (1H，d，J=1.8 Hz，H-8)，6.38 (1H，d，J=1.8 Hz，H-6)，5.11 (1H，d，J=7.8 Hz，H-1″)；13C-NMR (125 MHz，DMSO-d6)δ:148.0 (C-2)，136.7 (C-3)，176.8 (C-4)，161.0 (C-5)，99.3 (C-6)，163.4 (C-7)，94.5 (C-8)，156.5 (C-9)，105.4 (C-10)，122.3 (C-1′)，115.5 (C-2′)，145.4 (C-3′)，148.3 (C-4′)，116.4 (C-5′)，120.1 (C-6′)，100.0 (C-1″)，73.4 (C-2″)，76.6 (C-3″)，70.1 (C-4″)，77.3 (C-5″)，60.9 (C-6″)。以上数据与文献[10]基本一致，故鉴定为槲皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物8：浅黄色针状结晶，分子式C21H20O11。ESI-MSm/z:449.1[M+H]+。1H-NMR (400 MHz，DMSO-d6)δ:8.15 (2H，d，J=8.8 Hz，H-2′，6′)，7.02 (2H，d，J=8.8 Hz，H-3′，5′)，6.84 (1H，d，J=2.2 Hz，H-8)，6.46 (1H，d，J=2.2 Hz，H-6)，5.14 (1H，d，J=7.8 Hz，H-1″)；13C-NMR (125 MHz，DMSO-d6)δ:147.7 (C-2)，136.2 (C-3)，176.3 (C-4)，160.4 (C-5)，98.8 (C-6)，162.5 (C-7)，94.2 (C-8)，155.4 (C-9)，104.4 (C-10)，121.7 (C-1′)，129.8 (C-2′，6′)，115.6 (C-3′，5′)，159.6 (C-4′)，99.6 (C-1″)，73.3 (C-2″)，76.9 (C-3″)，69.7 (C-4″)，77.0 (C-5″)，60.8 (C-6″)。以上数据与文献[11]基本一致，故鉴定为山柰酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物9：黄色粉末，分子式C28H24O15，ESI-MSm/z:623.1[M+Na]+。1H-NMR (400 MHz，CD3OD)δ:7.33 (1H，d，J=2.0 Hz，H-2′)，7.31 (1H，dd，J=2.0，8.2 Hz，H-6′)，7.06 (2H，s，H-2‴，6‴)，6.90 (1H，d，J=8.2 Hz，H-5′)，6.31 (1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.13 (1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，5.61 (1H，m，H-2″)，5.49 (1H，d，J=1.5 Hz，H-1″)，0.98 (3H，d，J=5.8 Hz，-CH3)；13C-NMR (125 MHz，CD3OD)δ:159.2 (C-2)，136.3(C-3)，180.1 (C-4)，163.8 (C-5)，101.3 (C-6)，168.1 (C-7)，95.5 (C-8)，159.9 (C-9)，106.5 (C-10)，123.6 (C-1′)，117.1 (C-2′)，147.1 (C-3′)，150.5 (C-4′)，117.6 (C-5′)，123.8 (C-6′)，100.0 (C-1″)，74.1(C-2″)，71.0 (C-3″)，74.1 (C-4″)，72.9 (C-5″)，18.5 (C-6″)，121.9 (C-1‴)，110.7 (C-2‴，6‴)，149.5 (C-3‴，5‴)，140.6 (C-4‴)，166.1 (C-7‴)。以上数据与文献[12]基本一致，故鉴定为槲皮素-3-O-α-L-(2″-没食子酰基)-鼠李糖苷。

化合物10：黄色粉末，分子式C23H22O12，ESI-MSm/z:491.1[M+H]+。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ:7.48 (1H，dd，J=8.4，2.2 Hz，H-6′)，7.45 (1H，d，J=2.2 Hz，H-2′)，6.94 (1H，d，J=8.4 Hz，H-5′)，6.85 (1H，d，J=2.2 Hz，H-8)，6.79 (1H，s，H-3)，6.51 (1H，d，J=2.2 Hz，H-6)，5.34(1H，d，J=7.8 Hz，H-1″)，4.14 (2H，overlapped，-CH2)，1.22 (3H，t，J=7.0 Hz，-CH3)；13C-NMR (125 MHz，DMSO-d6)δ:164.3 (C-2)，103.1 (C-3)，182.2 (C-4)，157.3 (C-5)，99.1 (C-6)，162.4 (C-7)，94.9 (C-8)，161.0 (C-9)，105.3 (C-10)，119.5 (C-1′)，113.6 (C-2′)，145.7 (C-3′)，150.3 (C-4′)，116.3 (C-5′)，121.8 (C-6′)，99.2 (C-1″)，72.7 (C-2″)，75.4 (C-3″)，71.5 (C-4″)，75.2(C-5″)，168.9 (C-6″)，60.7 (-CH2-)，14.3(-CH3)。以上数据与文献[13]基本一致，故鉴定为木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸乙酯苷。

化合物11：浅黄色粉末，分子式C21H20O11，ESI-MSm/z:449.1[M+H]+。1H-NMR (400 MHz，DMSO-d6)δ:12.96 (1H，s，5-OH)，7.47 (1H，dd，J=2.2，8.4 Hz，H-6′)，7.44 (1H，d，J=2.2 Hz，H-2′)，6.92 (1H，d，J=8.4 Hz，H-5′)，6.76 (1H，d，J=2.2 Hz，H-8)，6.71 (1H，s，H-3)，6.42 (1H，d，J=2.2 Hz，H-6)，5.10 (1H，d，J=7.8 Hz，H-1″)；13C-NMR (125 MHz，DMSO-d6)δ:164.7 (C-2)，103.3 (C-3)，182.1 (C-4)，161.4 (C-5)，99.7 (C-6)，163.5 (C-7)，95.4 (C-8)，157.1 (C-9)，105.5 (C-10)，121.7 (C-1′)，114.2 (C-2′)，146.1 (C-3′)，150.5 (C-4′)，116.2 (C-5′)，119.4 (C-6′)，100.1 (C-1″)，73.4 (C-2″)，76.7 (C-3″)，70.1 (C-4″)，77.9 (C-5″)，61.3 (C-6″)。以上数据与文献[14]基本一致，故鉴定为木犀草苷。

化合物12：浅黄色针状结晶，分子式C18H16O8，ESI-MSm/z:383.1[M+Na]+。1H-NMR (400 MHz，DMSO-d6)δ:12.68 (1H，s，5-OH)，7.46 (1H，dd，J=2.2，8.4 Hz，H-6′)，7.40 (1H，d，J=2.2 Hz，H-2′)，7.02 (1H，d，J=8.4 Hz，H-5′)，6.59 (1H，s，H-3)，3.97 (3H，s，-OCH3)，3.96 (3H，s，-OCH3)，3.94 (3H，s，-OCH3)；13C-NMR (125 MHz，DMSO-d6)δ:163.1 (C-2)，102.7 (C-3)，182.5 (C-4)，148.2 (C-5)，131.1 (C-6)，150.6 (C-7)，128.1 (C-8)，145.1 (C-9)，102.6 (C-10)，121.5 (C-1′)，109.7 (C-2′)，148.6 (C-3′)，150.6 (C-4′)，115.7 (C-5′)，120.2 (C-6′)，60.4 (6-OCH3)，61.4 (8-OCH3)，56.0 (3′-OCH3)。以上数据与文献[15]基本一致，故鉴定为4′，5，7-三羟基-3′，6，8-三甲氧基黄酮。

化合物13：黄色针状结晶，分子式C15H12O5，ESI-MSm/z:295.1[M+Na]+。1H-NMR (400 MHz，DMSO-d6)δ:11.92 (1H，s，5-OH)，10.90 (1H，s，7-OH)，7.53 (2H，m，H-2′，H-6′)，7.42 (2H，m，H-3′，H-5′)，7.41 (1H，m，H-4′)，5.95 (1H，d，J=2.2 Hz，H-8)，5.91 (1H，d，J=2.2 Hz，H-6)，5.94 (1H，d，J=6.4 Hz，3-OH)，5.16 (1H，d，J=11.2 Hz，H-2)，4.60 (1H，dd，J=11.2，6.4 Hz，H-3)；13C-NMR (125 MHz，DMSO-d6)δ:82.7 (C-2)，71.3 (C-3)，197.4 (C-4)，163.2 (C-5)，96.0 (C-6)，166.5 (C-7)，95.3 (C-8)，162.1 (C-9)，100.2 (C-10)，137.5 (C-1′)，128.3 (C-2′，C-6′)，128.5 (C-3′，C-5′)，128.9 (C-4′)。以上数据与文献[16]基本一致，故鉴定为短叶松素。

化合物14：白色粉末，分子式C21H22O7，ESI-MSm/z:409.1[M+Na]+。1H-NMR (400 MHz，CD3OD)δ:6.92 (1H，s，H-6′)，6.34 (1H，s，H-3′)，5.94 (1H，s，H-6)，5.62 (1H，dd，J=12.4，3.6 Hz，H-2)，5.16 (1H，t，J=6.6 Hz，H-2″)，3.77 (1H，s，5′-OCH3)，3.16 (2H，brd，J=6.6 Hz，H-1″)，2.86 (1H，dd，J=17.0，12.4 Hz，H-3a)，2.78 (1H，dd，J=17.0，3.6 Hz，H-3b)，1.63 (3H，s，H-5″)，1.62 (3H，s，H-4″)；13C-NMR (125 MHz，CD3OD)δ:74.5 (C-2)，42.2 (C-3)，197.4 (C-4)，161.6 (C-5)，95.9 (C-6)，164.6 (C-7)，108.2 (C-8)，160.1 (C-9)，102.2 (C-10)，116.7 (C-1′)，148.3 (C-2′)，103.3 (C-3′)，146.5 (C-4′)，140.4 (C-5′)，110.2 (C-6′)，21.4 (C-1″)，122.8 (C-2″)，131.7 (C-3″)，17.4 (C-4″)，25.4 (C-5″)。以上数据与文献[17]基本一致，故鉴定为苦参醇 W。

4 讨论

核桃青皮是我国传统中药材，有着悠久的药用历史，近年来，随着现代科学技术的发展，对于核桃青皮化学成分的研究日益深入，但是就目前而言，对其正丁醇部位的研究报道较少。本实验通过现代提取分离技术，对核桃青皮正丁醇部位进行系统研究，共分离得到14个化合物，包括萘醌苷类、黄酮及其苷类，其中化合物1～5、7～11、13为首次从该植物中分离得到，化合物5、9为首次从胡桃属中分离得到。本研究在一定程度上丰富了核桃青皮的化学成分库，完善了核桃青皮正丁醇部位化学成分的研究，以期为核桃青皮正丁醇部位的药理活性研究提供物质基础，对今后核桃青皮的合理开发与利用具有指导意义。