李博琦 刘 铸 李春晓

(1.牡丹江师范学院，黑龙江牡丹江 157000；2.军事医学研究院微生物流行病研究所，病原微生物生物安全国家重点实验室, 北京市虫媒病与自然疫源性疾病重点实验室，北京 100071)

双翅目蚊科昆虫，如按蚊属、伊蚊属和库蚊属蚊虫，每年传播的蚊媒传染病导致上亿人感染，对全球公共卫生造成严重威胁。并且由于全球贸易现象导致其以入侵形式影响人类生活，并且范围逐渐扩大(Schaffneretal., 2013, 王晓明等, 2017)。近年来与蚊虫有关共生微生物的研究逐渐成为热点，这些共生微生物包括细菌、真菌和病毒。研究表明，蚊虫共生微生物对于蚊虫的生长、发育、繁殖、进化以及对病原的传播效能都有很大影响。明确共生微生物在蚊虫生命周期和传播循环中的作用，将为蚊虫及蚊媒病防控技术的发展提供新的思路和途径。

1 蚊虫共生微生物研究方法

蚊虫共生微生物的研究方法可以笼统地分为两大类，即细菌培养依赖型方法和非培养依赖型方法(王晓明等, 2017)。培养依赖型方法对培养条件要求较高，同时鉴定的菌种也仅限定在可培养的菌种中，但蚊虫体内的共生微生物通常包含许多不可培养的菌种，所以更适合使用非培养依赖型方法。目前非培养依赖型方法主要使用的分子手段包括变性梯度凝胶电泳(DGGE)、16 S rRNA基因测序、分子杂交、限制性片段长度多态性(RFLP)、核糖体DNA扩增片段限制性内切酶分析(ARDRA)、RT-qPCR等技术以及细菌宏基因组测序技术等(向候君等, 2018)。

宏基因组学是将环境中所有微生物整体作为研究对象，并以测序作为手段，来研究环境中微生物的多样性、种群结构、进化关系、基因功能及分类等(Levyetal., 2016)。……