方正武，卢奕霏，丁富功，王娜，康珍，侯泽豪，张迎新，王书平，马东方，刘易科，朱展望

1.长江大学农学院，湖北 荆州 434025 2.主要粮食作物产业化湖北省协同创新中心(长江大学)，湖北 荆州 434025 3.湖北荃银高科种业有限公司，湖北 荆州 434025 4.湖北省农业科学院粮食作物研究所，湖北 武汉430064

1 材料与方法

1.1 材料处理

供试甜荞品种为‘西农9976’。选择饱满且大小均匀一致的种子，用质量分数0.1%的HgCl2溶液消毒3min，经无菌水冲洗后整齐排放在铺有双层滤纸的培养皿中，待种子萌发后移至培养盒中，于光照培养箱中(温度设为25℃，光周期为光照12h/黑暗12h)培养至两叶一心后进行干旱胁迫处理。

1.2 试验方法

试验共设3个PEG-6000溶液胁迫梯度，质量分数分别为5%、10%和12%，以等量蒸馏水作为对照。每天分别向各培养盒中补充适当蒸馏水并摇匀，以保持各处理液浓度的相对稳定。每个处理重复3次。分别在处理后1、3d和5d剪取叶片，测定各生理生化指标。

1.3 相对含水量的测定

参照邹琦[20]的方法，稍加修改。每个处理随机剪取5株叶片，立即称取样品的鲜重(mFW)；随后将叶片浸入蒸馏水中12h取出，经滤纸吸去表面水分后，立即称取叶片的饱和鲜重(mSFW)。随后将叶片置于烘箱中，120℃杀青30min后，80℃烘干至恒重，冷却后称干重(mDW)。相对含水量(RWC)计算公式如下：

1.4 酶液制备

称取甜荞叶片0.3g置于预冷的研钵中，加入pH=7.8的50mmol/L磷酸缓冲液5mL，冰浴研磨，匀浆液转入15mL离心管中，再经磷酸缓冲液分2次冲洗研钵，合并于上述离心管中，于4℃下3000r/min离心20min，取上清液低温保存备用。

1.5 超氧阴离子自由基产生速率及过氧化氢(H2O2)含量的测定