肖琦 蒋彩霞 史慧 赵霞玲 钱雯娴 朱家平 张冯禧 温立斌 汪伟 何孔旺

摘要：为评估目前常用商品化非洲猪瘟荧光定量PCR检测试剂盒，参考OIE推荐的非洲猪瘟病毒（ASFV）荧光定量PCR方法合成引物和探针，建立非洲猪瘟病毒qPCR检测方法（OIE-qPCR）;并与市面4种ASFV检测试剂盒进行了比较。以人工合成的ASFV p72基因TA克隆重组质粒为阳性标准品，OIE-qPCR可以检测到10～102 copies;而4种ASFV荧光定量PCR检测试剂盒中，进口试剂盒TF-qPCR能检测到10 copies，进口试剂盒ID-qPCR和国产试剂盒QD-qPCR能检测到10～102 copies，而国产试剂盒LY-qPCR能检测到102 copies。对健康猪组织样及临床模拟样品的检测结果显示：OIE-qPCR与4种检测试剂盒之间的符合率为92.60%～99.03%。其中，阳性样品CT值的相关系数为0.988～0.997（Perason法），表明各试剂盒之间相关性良好;但在检测病毒核酸含量较低的样品时，各试剂盒结果之间存在一定差异，其中，TF-qPCR试剂盒显示更高的阳性检出率，ID-qPCR试剂盒和LY-qPCR试剂盒次之。本研究为临床选用非洲猪瘟病毒快速检测试剂盒提供了依据。

关键词：非洲猪瘟病毒;检测;荧光定量PCR;灵敏性;稳定性;敏感性

中图分类号：S852.65+1 文献标志码： A文章编号：1002-1302（2021）02-0119-06

收稿日期：2020-11-13

基金项目：江苏省现代农业（生猪）产业技术体系生物安全创新团队项目（编号：JATS[2019]403）。

作者简介：肖琦（1980—），女，辽宁丹东人，博士，助理研究员，主要从事猪病及人兽共患病防控研究。E-mail：xiaoqi_2122@163.com。

通信作者：何孔旺，研究员，主要从事猪病及人兽共患病防控研究。E-mail：kwh2003@263.net。

非洲猪瘟自从2018年8月在我国首次报道[1]以来，对我国养猪业造成了巨大的经济损失[2]。病原的快速检测在防控非洲猪瘟上发挥着十分重要的作用。……