严晓娣，史国振，毛旭华

1南通大学附属医院肿瘤放疗科，江苏 南通 226001；2江苏大学附属宜兴医院心胸外科，3检验科，江苏 无锡 214200

肺癌是世界范围内发病率和病死率最高的恶性肿瘤之一［1］。据中国癌症统计报告，中国2015 年有429 万例肺癌新发病例，281 万例肺癌死亡病例［2-3］。肺癌患者中约80%为非小细胞肺癌（non⁃small⁃cell lung cancer，NSCLC），60%～70%的NSCLC患者首诊时已处于中晚期［4］，失去了手术治疗机会。近年来以表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）⁃酪氨酸激酶抑制剂（tyro⁃sine kinase inhibitor，TKI）为代表的靶向治疗取得飞速发展。研究表明，EGFR、KRAS、BRAF、NRAS、PIK3CA 和Her⁃2 等基因的突变状态与NSCLC患者TKI 靶向治疗的疗效、肿瘤转移以及预后相关［5-7］。因此，全面准确地检测相关基因显得尤为重要。

目前常用的基因检测方法主要有Sanger 测序法、高通量测序技术、实时荧光定量PCR法、微滴式数字PCR 技术（droplet digital PCR，ddPCR）等。Sanger 测序法被认为是基因检测的“金标准”，但其操作步骤繁琐、耗时长、检测灵敏度不高。高通量测序技术具有海量检测分析能力，能够一次检测多个基因的多个突变位点序列，节省肿瘤样本DNA。ddPCR 技术是一种新发展起来的检测方法，其具有更高的精度和灵敏度，且可绝对定量。

本研究应用个体化基因组测序（personal genome machine，PGM）平台，对150 例NSCLC 患者EGFR、KRAS、BRAF、NRAS、Her⁃2 和PIK3CA 基因突变状态进行检测并分析，同时采用Sanger 测序及ddPCR技术对150例NSCLC患者EGFR基因突变状态进行检测并加以对比分析。

1 材料和方法

1.1 标本

病例纳入标准：①病理证实为NSCLC；②年龄大于18岁；③有可测量病灶（CT测得长径≥10 mm）；④心电图、血常规、肝肾功能、骨髓功能基本正常；⑤患者及家属知情并同意。病例排除标准：①造血功能严重障碍者，肝肾功能严重损害者；……