基于链替代信号放大灵敏检测端粒酶活性的电化学方法
2021-03-18马艳蓉江胜男
高等学校化学学报 2021年3期
关键词:检测
马艳蓉,江胜男,金 燕
(1.北方民族大学预科教育学院,银川750021;2.陕西师范大学化学化工学院,陕西省生命分析重点实验室,西安710062)
端粒酶(Telomerase)能够以其RNA作为模板,在染色体末端合成端粒重复序列(TTAGGG)n,从而维持端粒的长度稳定,使细胞永生化.研究表明,端粒酶在85%以上的人类肿瘤细胞中高表达,而在正常体细胞中的表达量则极低甚至不表达.因此,端粒酶是一种广谱性的肿瘤标志物[1~8],灵敏可靠检测其活性对于肿瘤的早期诊断和抗癌药物的研发具有重要意义.基于聚合酶链式反应(PCR)的端粒重复序列扩增法(TRAP)是检测端粒酶活性的经典方法,但其操作过程复杂、费时,会因为PCR过程带来假阳性结果,而且无法区分细胞内端粒酶活性的差异.为了实现端粒酶活性的灵敏、便捷检测,荧光法[9~12]、比色法[13,14]、化学发光法[15,16]及电化学法等方法不断涌现.由于具有设备简单、低廉、检测快速及响应灵敏等优点,电化学法已经成为生物分析的重要手段之一[17,18].Shao等[19]提出了一种基于端粒重复序列中鸟嘌呤电化学响应检测端粒酶活性的电化学方法.Wang等[20]基于DNA磷酸基团与钼酸盐反应合成了一种具有电化学活性的磷钼酸盐来检测端粒酶活性.Liu等[21]建立了一种基于T7核酸外切酶辅助循环反应用于检测癌细胞中端粒酶活性的电化学方法.Liu等[22]利用端粒酶延长产物形成的G-四链体DNAzyme催化苯胺,以合成具有电化学活性的聚苯胺来检测端粒酶活性.Lei等[23]以亚甲基蓝和对苯二酚为信号分……
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