操良会

（重庆市长寿区中医院 检验科，重庆 401220）

0 引言

沙眼衣原体（CT）感染为常见的性传播疾病。我国的CT感染率较高，特别是高危人群的感染率达5%-17%[1]。目前，CT检测采用直接镜检、细胞培养、直接荧光抗体染色等方法[2]，其中细胞培养是“金标准”。连接酶链反应（LCR）是类似于PCR，通过耐热DNA连接酶将2对引物连接到靶核苷酸序列上，并在体外进行变性、复性完成核酸扩增[3]。本文探讨LCR在CT检测中的应用，为临床提供快速高效的实验诊断。

1 资料与方法

1.1 一般资料。实验组：2017年1至10月我院收治的160例CT感染者，男77例，女83例，年龄15～73岁；对照组：同期进行体检的30例健康人，男21例，女9例，年龄1～72岁。纳入标准：至少一种泌尿生殖道感染症状（如：分泌物增多、排尿困难、外阴红肿瘙痒）；有非婚性接触史，或2周内有过与上述症状者性交，且未接受过抗生素治疗。排除标准：无非婚性行为，生殖道不适，外阴红肿。

1.2 细胞培养。Hella229细胞（中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库）与含10%FBS（SH30396.03，HyClone）的1640（SH30809.01，HyClone）培养液混合调整密度为1×105/mL，取0.5 mL混合液加入24孔板中放入37℃，5%CO2培养箱中培养48 h，吸出培养液，向培养液中加入0.2 mL待检者生殖器拭取物标本，3000 rpm离心1 h，取上清液后加入混合试剂（放线菌酮1μg/mL、庆大霉素10μg/mL、万古霉素10μg/mL、两性霉素B2.5μg/mL及衣原体培养液1 mL），将样本与标准阳性标本进行比较。

1.3 连接酶链反应（LCR）。采集晨尿或长时间不排尿后的首次尿20-30 mL。检测前混合尿液，取1 mL加入到微型离心管中离心（13000 rpm，10 min），弃上清液，加入1 mL裂解液（碧云天生物技术有限公司）。取100μL裂解物置入扩增管，按CT试剂盒配置反应体系（美国Abbot公司），放入LCR扩增仪（Abbott LCx Thermal Cycler）进行扩增。……