王广交，辛嘉英,，崔添玉，李越，夏春谷

(1.哈尔滨商业大学 食品科学与工程重点实验室，黑龙江 哈尔滨 150076；2.中国科学院 兰州化学物理研究所 羰基合成与选择氧化国家重点实验室，甘肃 兰州 730000)

四氢嘧啶(1,4,5,6-四氢-2-甲基-4-吡啶羧酸)是一种普遍存在于嗜盐微生物中的环状亚氨基酸，其可使细胞在极端环境下依然保持活性[1-5]。近年来研究发现，其可被应用于食品[6-7]、医疗[8-14]、美容等[15-19]领域。由于四氢嘧啶具有一个手性碳原子，难以化学合成，故选择生物法合成四氢嘧啶[20-21]。本文探究甲基弯菌MethylosinustrichosporiumOB3b合成四氢嘧啶，该菌存在于泥泞的沼泽或水草茂密的池塘，容易获得，且可以CH4为唯一碳源生长，使用液体无机盐培养基在较低盐浓度下合成四氢嘧啶，经济价值高，环境友好，实用性价值高。目前合成四氢嘧啶的工业菌株有限，以期甲基弯菌MethylosinustrichosporiumOB3b可对四氢嘧啶的生物合成技术提供参考。

1 实验部分

1.1 材料与仪器

甲基弯菌MethylosinustrichosporiumOB3b由清华大学邢新会教授提供，由本文作者实验室保存，保存条件为4 ℃，保存过程中定期将菌株重复培养;氯化铵、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、硝酸钾、氯化钠、磷酸氢二钠、氯化钙、硫酸镁、氯化铁、硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸锌、钼酸钠、正丁醇、甲酸、碘、甲醇、乙腈均为分析纯；四氢嘧啶，标准品(≥98%)，润慧生物科技有限公司；甲醇、乙腈均为色谱纯。

UV-5100B紫外可见分光光度计；KH-2000双波长薄层色谱扫描仪;RV10旋转蒸发仪；spectrum Two傅里叶变换红外光谱仪；U3000高效液相色谱仪；BLBI0-HYG-FJ2生物反应器摇床；LDZX-50KBS立式高压蒸气灭菌器；SX2-2.5箱式电阻炉；……