赵露，田胜，刘璐，刘叶，童珊珊，徐希明

(江苏大学药学院，江苏 镇江 212013)

杨梅叶中富含黄酮、有机酸、多糖等多种生物活性成分，具有降血糖、肝脏保护、抗氧化、抗菌等作用[1-2]。研究表明，杨梅叶黄酮化合物对自由基具有较强的清除能力[3-4]。但目前杨梅叶中黄酮类成分的抗氧化活性成分的筛选研究尚停留在总提取物、总黄酮或杨梅苷、槲皮素等个别化合物层面[5]，基于在线筛选的方法一次性分离及评价杨梅叶中的多个抗氧化活性成分尚不清楚。经典的抗氧化活性测定方法包括ABTS自由基清除实验、2，2-联苯基-1-苦基肼基(DPPH)自由基清除实验、铁离子还原(FRAP)实验等[6-7]。本实验结合经典的抗氧化评价方法，建立了一种2，2-联苯基-1-苦基肼基-高效液相色谱(DPPH-HPLC)在线筛选杨梅叶中抗氧化活性成分的方法。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

DPPH(批号：C10091989，上海麦克林生化科技有限公司)；总抗氧化能力检测试剂盒(ABTS 法，南京建成生物工程研究所)；甲醇和乙腈购买自国药集团(色谱纯)；对照品购买自上海阿拉丁生化科技股份有限公司；槲皮素、杨梅素、杨梅苷和山柰酚质量分数均≥98%，杨梅叶采自江苏镇江江苏大学图书馆后山，经江苏大学药学院傅海珍老师鉴定为双子叶纲杨梅科杨梅属植物杨梅(Myricarubra)的干燥叶子；抗坏血酸、2,4,6-三吡啶基三嗪(TPTZ)、醋酸、FeCl3及其他试剂等均为分析纯；娃哈哈纯净水若干。

LC-20AT VP型高效液相色谱仪、SPD-20A 型紫外检测器均为日本Shimadzu公司产品；N2000型色谱数据工作站(浙江大学智达信息工程有限公司)；XT120A型电子天平(瑞士Precisa公司)；……