李洋，余江南，徐希明

(江苏大学药学院，江苏 镇江 212013)

脊髓损伤是常见的中枢神经系统损伤疾病，对患者身心均造成严重创伤。其发病率高、继发反应复杂、治愈率低，一直是全世界范围内急需攻克的医学难题[1]。目前的治疗策略主要是抑制胶质瘢痕的产生、促进神经细胞再生以及重构创伤部位的微环境[2-3]。已有报道脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)对脊髓损伤有明显的修复作用[4-5]。BDNF通过作用于全长型酪氨酸受体激酶B发挥神经保护、炎性因子调节等作用[6-7]。然而BDNF在体内易失活从而难以发挥持续滋养受损部位的作用，因此构建BDNF缓释释药体系有利于药物应用。聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic acid-glycolic acid),PLGA]是组织工程领域中应用广泛的生物材料[8]，具有良好的生物相容性[9]，PLGA纳米粒可提高生长因子的稳定性以及实现药物的缓释[10]。

本研究采用复乳化溶剂挥发法制备BDNF-PLGA纳米粒，利用正交试验设计优化制备工艺，最后对制得样品进行表征及生物相容性评价。

1 材料和方法

1.1 主要试剂及仪器

PLGA(75∶25)相对分子质量为24 000～38 000(济南岱罡生物科技有限公司)；聚乙烯醇，相对分子质量13 000～23 000(日本可乐丽公司)；甘露醇、蔗糖(国药试剂)；超高速离心机(美国 Beckman公司)；冷冻干燥机(德国CHRIST公司)；动态光散射及Zeta电位测定仪(德国Bruke公司)；透射电镜(日本日立公司)；BCA蛋白定量试剂盒及BDNF-ELISA试剂盒(南京福麦斯生物技术有限公司)；BDNF(美国Peprotech公司)；酶标仪(美国BioTek公司)。

1.2 BNDF-PLGA纳米粒的制备

配制二氯甲烷/丙酮=3∶1(体积比)混合溶液，称取PLGA粉末，溶解于上述溶液中，获得PLGA溶液。……