105例肺癌患者外周血中miRNA-10b的表达
2021-03-11杨云龙汪建中
杨云龙,汪建中
(北华大学附属医院,吉林 吉林 132011)
肺癌是目前最常见的恶性肿瘤,其中大部分为非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC),约占肺癌患者的85%,NSCLC主要分为鳞癌、腺癌和大细胞癌3个病理类型[1].近年,随着分子生物学技术的不断发展,探寻有效的预测疗效的生物学标志是实现个性化治疗的关键,对NSCLC患者的诊断、预后具有重要的评估价值[2].MicroRNA(miRNA)是在真核生物体内发现的一类非编码性的内源性RNA,约含20~25个核苷酸,具有各种调控功能.miRNA拥有多种生物学活性,对人体的生长发育,尤其对恶性肿瘤的产生、侵袭、转移等过程有重大影响,是肺癌领域内的研究热点[3-5].本研究旨在探讨NSCLC患者外周血中miRNA-10b的表达情况与转移淋巴结、肝脑等远处转移和病理TNM分期的相关性.
1 材料和方法
1.1 材料标本
选择2015年11月—2019年11月在北华大学附属医院确诊的NSCLC患者156例,105例入实验组,51例排除.另选50例同期体检健康人员为正常对照组,所有受试者均签署临床实验告知书.采集NSCLC患者外周血清3 mL,制备用于miRNA-10b检测的RNA提取液,吸光度在1.8~2.1之间.
1.2 主要药品及设备
CFX96荧光定量PCR仪(Bio-Rad公司,美国);BioPhotometer Plus核酸蛋白定量检测仪(Eppendorf公司,德国);Ficoll单个核细胞分离液(天津灏洋生物制品科技有限公司);mirVana miRNA试剂盒(Ambion公司,美国);乙二胺四乙酸(EDTA)SYBR Premix ExTaqⅡ试剂盒(Solarbio公司,美国).
1.3 统计学分析

2 方 法
2.1 单个核细胞中RNA的提取
采集NSCLC患者外周血清3 mL,应用络合剂EDTA将外周血清抗凝,应用Ficoll液分离外周血单个核细胞,并放置在-80 ℃冰箱中保存待用;应用 miRNA试剂盒提取单个核细胞中的总RNA,进一步检测miRNA-10b浓度.