钟春蕾,黄国涛,杨洋,申思,张志强

（1.新乡医学院第一附属医院呼吸内科二病区，河南卫辉453100；2.新乡医学院第一附属医院心内科二病区，河南卫辉453100）

肺癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一,也是导致癌症死亡的主要原因[1]。非小细胞肺癌(non⁃small cell lung cancer,NSCLC)几乎占所有肺癌的80%[2]。由于转移,预后较差,治疗选择有限[3]。癌细胞转移是癌症死亡的主要原因,并且是涉及入侵和迁移的复杂的多步骤过程[4⁃5]。在许多情况下,晚期NSCLC患者预后不良和治疗失败是造成从原发部位到远处器官的局部浸润或转移的原因[6]。尽管在过去的几十年中早期诊断的改善和铂类化学疗法的发展,NSCLC患者的预后和存活率仍然不能令人满意,因此,迫切需要制定预防转移策略并寻找新的、安全有效的肺癌预防剂。长期以来,植物来源的天然产物一直被认为是抗癌剂的来源,并且正在针对几种类型的癌症进行评估。龙胆苦苷(gentiopicroside,GPS)是龙胆草的活性成分之一,据报道具有多种药理作用,包括抗炎[7]、保肝[8]和止痛[9]。最近,由于低毒的优势,GPS作为抗肝癌[10]和卵巢癌[11]的潜在抗癌剂受到越来越多的关注,但GPS对人类NSCLC是否具有抑制作用及其潜在机制尚不清楚。

1 材料与方法

1.1 主要试剂和仪器

龙胆苦苷(gentiopicroside,GPS，美国Sigma);胎牛血清(FBS)、RPMI⁃1640培养基、胰酶(美国Invitrogen);TRIzol试剂(美国Thermo Fisher);CCK⁃8试剂盒、结晶紫、RIPA裂解液、BCA试剂盒、ECL发光液(上海碧云天);白细胞介素(interleukin,IL)⁃6、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和IL⁃1β ELISA试剂盒(武汉博士德);P65、p⁃P65、β⁃actin、E⁃cad、N⁃cad和Vimentin兔抗单克隆抗体、山羊抗兔IgG(Alexa Fluor®488)荧光二抗(美国CST公司);辣根过氧化物酶标记……