徐 杰，李 刚，张 凡，周永顺，何 营，韩 凯，陈福龙，高剑峰

(石河子大学 生命科学学院，新疆 石河子 832003)

一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)是一氧化氮(NO)产生过程中的限速酶[1]，其主要包括3种亚型，即诱导型(iNOS、NOS2)、神经元型(nNOS、NOS1)和内皮型(eNOS、NOS3)[2]，其中后两者又被统称为结构型NOS(cNOS)。cNOS主要存在于体细胞中，可以产生少量的NO用于维持正常生理活动；iNOS则存在于各种炎症细胞中，在某些因素诱导下产生大量的NO[3]，在炎症的进展中起着关键作用[4]。目前对于iNOS的研究大多集中在类风湿性关节炎[5]、疟疾[6]、慢性胰腺炎[7]、高血压[8]、糖尿病[9]、乳腺炎[10]等疾病上，例如Negi等[5]研究发现，iNOS基因启动子的多态性可以增加南印度泰米尔类风湿性关节炎的风险，且iNOS的多态性与机体的免疫疾病有关。Kumar等[6]研究发现，iNOS的多态性影响NOS的表达和NO的生成，可作为评价临床疟疾的潜在诊断指标。

布鲁菌(Brucella)是一种兼性胞内寄生菌，能直接或者间接地感染人或动物[11-12]，对于发展中国家和地区的人畜产生了严重的危害[13-15]。羊布鲁菌是布鲁菌中致病力最强的一种[16]。近年来，对iNOS的研究大多集中在各种炎症相关的疾病上，而在iNOS多态性与绵羊布鲁菌易感性方面的相关研究报道较少。因此，本试验以哈萨克羊为研究对象，采用虎红平板凝集试验(RBPT)检测试羊布鲁菌感染状况，并利用PCR-SSCP技术和DNA测序技术检测iNOS基因的多态性，分析iNOS基因多态性与布鲁菌易感性的关系，旨在为抗布鲁菌病绵羊的选育提供新的方法。

1 材料与方法

1.1 试验材料

虎红平板凝集抗原、标准阳性血清、标准阴性血清，购于哈药集团生物疫苗有限公司；……