张 诚，郭承意，周 雷，仝丽娜，文 英，李增魁，张红见，贺晓龙，贾跃宁，康 明，高小龙

(青海大学 农牧学院，青海 西宁 810000)

H9N2亚型禽流感(avian influenza,AI)是目前全世界养禽业流行最广泛的低致病性禽流感,自20世纪60年代从美国火鸡上分离鉴定出H9N2禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)以来，该病毒迅速扩散至世界各地[1-3]。我国于20世纪90年代中期首次从广东省分离到该病毒，之后在全国鸡群中广泛流行[4]。虽然H9N2 AIV致病性较低，鸡群感染后死亡率不到20%，但往往会引起产蛋率严重下降，造成巨大经济损失[5]。同时,H9N2 AIV存在感染人的风险，还可为其他AIV病毒重组提供机会，对公共卫生安全的潜在性威胁不容忽视[6]。因此，加强H9N2 AIV的防控刻不容缓。目前，防控H9N2 AIV的主要措施是接种灭活疫苗，但是由于AIV病毒变异性强，在疫苗免疫的压力下易发生抗原漂移和替换，加上疫苗株和流行毒株不匹配等问题，导致免疫鸡群感染H9N2 AIV的情况时有发生[7-11]。因此，开发新的预防性和治疗性生物制剂很有必要。

纳米抗体(nanobodies,Nbs)是天然存在的具有抗原识别功能的最小的抗体片段，来源于20世纪90年代Hamers等[12]发现的重链抗体(heavy chain antibodies,HCAbs)。重链抗体可变区(variable domain of camelid heavy-chain antibody,VHH)的分子质量仅有15 ku，体积在纳米级，因此也称为Nbs。由于Nbs分子质量小，只有常规抗体的1/10，因此具有许多传统抗体无法比拟的优势，如稳定性强，能耐90 ℃高温和极端pH等环境；亲和力高，与抗原结合的亲和力可达纳摩尔级，甚至皮摩尔级；可识别常规抗体不易识别的结构和表位，如酶的裂隙和其他抗原的凹槽等；适于通过原核或真核表达系统大规模制备，成本低廉，且穿透力强、免疫原性低[13]。……