徐永艳，苏 明，方笑涵，刘 畅，刘芃菲，赵晓涛(北京大学人民医院检验科，北京 100044)

动脉粥样硬化是多种心脑血管疾病的病理基础，以动脉内膜增厚、脂质沉积、粥样斑块形成为特点，其中易损斑块容易发生破裂并诱导血栓形成，与心肌梗死、脑梗死等心脑血管事件的发病密切相关[1-3]。血管平滑肌细胞的过度凋亡与凋亡基因中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase，Caspase-3)的表达水平上升有关[4-5]。核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2，Nrf2)/抗氧化反应元件(anti-oxidative response element，ARE)通路是在心脑血管疾病中起重要作用的抗氧化通路，其也在细胞凋亡中起调控作用[6]。淫羊藿的有效成分淫羊藿苷具有保护作用，在肝脏、肾脏中均通过激活Nrf2/ARE通路减轻不同病理因素引起的组织损伤[7-8]。本研究将在载脂蛋白E(apolipoprotein E，ApoE)-/-小鼠动脉粥样硬化易损斑块模型中研究淫羊藿苷对细胞凋亡及Nrf2/ARE通路的调控作用。

1 仪器与材料

1.1仪器 正置显微镜(日本Nikon公司)；凝胶电泳仪及成像仪(美国Bio-rad公司)。

1.2试药 淫羊藿苷(美国Sigma公司)；HE检测试剂盒、TUNEL检测试剂盒均购自上海碧云天生物技术有限公司；Bax、Bcl-2、Caspase-3、Nrf2和ARE一抗均购自Abcam公司；MDA、8-OHdG和TAC检测试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.3动物 24只SPF级ApoE-/-小鼠[雄性、18～20 g，许可证SCXK(京)2016-0011]，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。

2 方法

2.1动物分组、造模及给药 将ApoE-/-小鼠随机分为对照组、模型组和淫羊藿苷组，每组各8只。全部小鼠均腹腔注射戊巴比妥钠进行麻醉，做颈正中切口、分离颈总动脉，对照组不进行其他操作，模型组和淫羊藿苷组在动脉周围植入内径0.3 mm的硅胶管，用6-0丝线固定，关闭切口。……