张敏，杨丹娇，蓝岚，刘怡雯，叶忠明

（四川省甘孜藏族自治州畜牧业科学研究所，四川康定 626000）

羊口疮又称羊传染性脓疱，是由羊口疮病毒（ORFV）引起的一类人兽共患接触性传染病。该病多见于小反刍兽，其中羊群最为易感。羊口疮病毒属于痘病毒科、副痘病毒属，该病毒具有很强的嗜上皮性，感染羊病程初期主要表现为口唇、舌、鼻部出现红疹，进而表现为张口呼吸、口腔分泌物增多、流涎、采食减少，病程后期食欲废绝，感染部位有明显的水泡、脓疱、糜烂，最后形成结痂［1］。该病分布广泛，澳大利亚、新西兰、意大利、印度、韩国等均有羊口疮发病的报道［2］。近年来我国大力发展养羊业，羊只交易频繁，加速了该病在我国各地区的发生。有报道我国甘肃、新疆等省份发生过该病［3］。

注射疫苗是预防该病的有效方法，但是我国至今还没有ORF商品化疫苗，疫苗研究还处于实验室评估阶段［4］。因此，及时准确地诊断该病，并对患病羊进行隔离和对症治疗，是阻止该病扩散的有效途径。目前，用于诊断ORF的方法主要有电子显微镜检查、血清学方法、PCR扩增、LAMP技术等［5］。SYBR Green Ι 实时荧光定量PCR和常规方法相比，具有特异性强、灵敏度高等突出优势［6］。本试验基于临床上快速高通量检测OR⁃FV的需求，建立了快速检测ORFV DNA的SYBR Green I实时荧光定量PCR方法。

1 材料

1.1 毒株 羊口疮病毒四川毒株（ORFV-SC）由西南民族大学实验室分离鉴定并保存。山羊痘疫苗、绵羊痘疫苗均由西南民族大学实验室保存。

1.2 主要试剂及仪器 质粒提取试剂盒购自OMEGA Bio-Tek公司；……